DNA absorberar UV-ljus med en våglängd med maximal absorbans nära 260 nm. Denna absorption beror på pi-elektronerna i DNA:s aromatiska baser. I dsDNA, eller till och med i områden av RNA där dubbelsträngad struktur förekommer, är baserna staplade parallellt med varandra, och överlappningen av basernas molekylära orbitaler leder till en minskning av absorptionen av UV-ljus. Detta fenomen kallas den hypokroma effekten. När DNAse frigör nukleotider från dsDNA är baserna inte längre staplade på samma sätt som i dsDNA, så att överlappningen av orbitalerna minimeras och UV-absorptionen ökar. Denna ökning av absorbansen ligger till grund för Kunitz-enheten för DNAseaktivitet. En Kunitz-enhet definieras som den mängd enzym som tillsätts till 1 mg/ml DNA från laxsperma och som orsakar en ökning av absorbansen med 0,001 per minut vid våglängden 260 nm när den verkar på högpolymeriserat DNA vid 25 °C i en 0,1 M NaOAc (pH 5,0)-buffert. Enhetens namn är ett erkännande av den rysk-amerikanske biokemisten M. Kunitz, som föreslog standardtestet 1946.
Ett standardenzympreparat bör köras parallellt med ett okänt eftersom standardisering av DNA-preparat och deras polymerisationsgrad i lösning inte är möjlig.