DNA absorberer UV-lys med en bølgelængde med maksimal absorbans nær 260 nm. Denne absorption skyldes pi-elektronerne i de aromatiske baser i DNA’ets aromatiske baser. I dsDNA eller endog i områder af RNA, hvor der forekommer dobbeltstrenget struktur, er baserne stablet parallelt med hinanden, og overlapningen af basernes molekylære orbitaler fører til et fald i absorptionen af UV-lys. Dette fænomen kaldes den hypokromiske effekt. Når DNAse frigør nukleotider fra dsDNA, er baserne ikke længere stablet på samme måde som i dsDNA, således at orbitaloverlapningen minimeres, og UV-absorbansen øges. Denne stigning i absorbansen ligger til grund for Kunitz-enheden for DNAse-aktivitet. En Kunitz-enhed er defineret som den mængde enzym, der tilsættes til 1 mg/ml laksesæd-DNA, som forårsager en stigning i absorbansen på 0,001 pr. minut ved bølgelængden 260 nm, når det virker på stærkt polymeriseret DNA ved 25 °C i en 0,1 M NaOAc (pH 5,0)-buffer. Enhedens navn er en anerkendelse af den russisk-amerikanske biokemiker M. Kunitz, som foreslog standardtesten i 1946.

Et standardenzympræparat bør køres parallelt med et ukendt, fordi standardisering af DNA-præparater og deres polymerisationsgrad i opløsning ikke er mulig.

Skriv et svar

Din e-mailadresse vil ikke blive publiceret.