Klinisk information
CD20 är ett protein som uttrycks på ytan av B-celler, från och med pre-B-cellstadiet och även på mogna B-celler i benmärgen och i periferin. CD20 uttrycks inte på hematopoietiska stamceller, pro-B-celler eller normala plasmaceller. 1) Plasmablaster och stimulerade plasmaceller kan uttrycka CD20. 2) CD20 uttrycks i allmänhet på B-celler tillsammans med CD19, en annan B-celldifferentieringsmarkör. CD20 verkar spela en roll i B-cellernas utveckling, differentiering, signalering via B-cellreceptor (BCR) och initiering av cellcykeln (3). CD20 avges inte från B-cellernas yta och internaliseras inte vid bindning med en anti-CD20-antikropp, och finns inte heller vanligtvis som ett lösligt fritt antigen i cirkulationen.(3) Vissa primära humorala immunbrister, t.ex. X-bunden agammaglobulinemi och autosomalt recessivagammaglobulinemi, kännetecknas av fullständig avsaknad eller kraftig minskning av perifera B-celler som uttrycker både CD20 och CD19 (en annan differentieringsmarkör för B-celler).
Mutationer i CD19-genen har visat sig vara förknippade med en primär humoral immunbrist, som ibland klassificeras som vanlig variabel immunbrist (CVID).4 Denna defekt står för mindre än 1 % till 2 % av CVID-patienterna och verkar nedärvas som en autosomalt recessiv defekt.(4) Eftersom dessa patienter har ett normalt antal B-celler med avsaknad av CD19-uttryck på cellytan (4) kan CD20 användas som en markör för att hjälpa till att identifiera dessa patienter.
En kontrasterande situation föreligger för patienter som får rituximab, ofatumumab och andra monoklonala antikroppar mot CD20 som används för att behandla vissa cancerformer, autoimmuna sjukdomar eller för B-celldepletion för att förhindra humorala avstötningar vid positiv crossmatch-njurtransplantation. Dessa medel blockerar tillgängliga CD20-bindningsställen och därför kan den antikropp som används för denna flödescytometriska analys inte känna igen CD20-molekylen på B-celler. Den samtidiga användningen av CD19-markören ger information om omfattningen av B-cellsdepletion vid användning av denna särskilda behandlingsstrategi.
De absoluta siffrorna för lymfocytundergrupper är kända för att påverkas av en mängd biologiska faktorer, inklusive hormoner, miljö och temperatur. Studier om dygnsvariation (cirkadisk variation) i antalet lymfocyter har visat på en progressiv ökning av antalet CD4 T-celler under hela dagen, medan antalet CD8 T-celler och CD19+ B-celler ökar mellan kl. 8.30 och 12.00, utan att det sker någon förändring mellan kl. 12.00 och eftermiddagen. Antalet naturliga mördarceller är däremot konstant under hela dagen.(5) Cirkadiska variationer i antalet cirkulerande T-celler har visat sig vara negativt korrelerade med plasmakortisolkoncentrationen.(6-8) Kortisol- och katekolaminkoncentrationer styr faktiskt fördelningen och därmed antalet naiva respektive effektor-CD4- och CD8-T-celler.(6) Det är allmänt accepterat att lägre antal CD4 T-celler ses på morgonen jämfört med kvällen (9), och under sommaren jämfört med vintern.(10) Dessa data tyder därför på att tidpunkten och konsekvens i tidpunkten för blodprovstagning är kritisk när man seriemässigt övervakar patienter för lymfocytundergrupper.