Vad är immunohistokemi?
Immunohistokemi (IHC) anses vara en avancerad form av histopatologi. Immunohistokemi används vanligtvis inte initialt utan läggs till när rutin/regelbunden histologisk undersökning är otillräcklig för att ställa en diagnos.
IHC använder primära antikroppar för att märka ett protein och använder sedan en sekundär antikropp som är bunden till den primära antikroppen. Vid immunoperoxidasfärgning kopplas en antikropp till ett enzym, peroxidas, som katalyserar en reaktion där proteinet färgas specifikt brunt. IHC kan också innehålla fluorescerande märkta antikroppar så att när de betraktas i ett ljusmikroskop kommer ett visst mönster att observeras från den utsända fluorescensen.
IHC-mönstret anses vara diagnostiskt och visar nukleära, membranösa eller cytoplasmatiska mönster. IHC används ofta i situationer där närvaron eller frånvaron av vissa proteiner kan ligga till grund för en diagnos. Det kan också användas för att skilja mellan två olika sjukdomsprocesser som annars kan se likadana ut för patologen.
Hur utförs immunohistokemi?
Den vanligaste processen för att förbereda immunohistokemiska objektglas är följande:
- Fixering av vävnaden (i allmänhet fixeras IHC-färgningar med formalin)
- Inbäddning av vävnaden (i paraffin)
- Sektionering av vävnaderna
- Hämtning (sker med hjälp av värme eller proteolytiska enzymer)
- Instöpning och dehydrering
- Rensning och observation av preparaten.
Vad är fördelarna och nackdelarna med immunohistokemi?
Fördelarna med IHC är bland annat:
- Det är möjligt att använda färska eller frysta vävnadsprover för IHC.
- IHC är väletablerat och lättillgängligt.
- Kostnaden för IHC är relativt låg
- Det har en snabb genomströmningstid.
- Då det inte är fråga om några levande infektiösa agens, är risken för människors hälsa minimal.
Nackdelarna med IHC är följande:
- IHC-färgerna är inte standardiserade över hela världen.
- Men även om kostnaden för förfarandet är relativt billig är utrustningen som behövs för att utföra IHC kostsam.
- Det är svårt att kvantifiera resultaten.
- IHC är utsatt för mänskliga fel. Välutbildad personal är av största vikt.
Vad är några exempel på immunohistokemiska färgningar?
Hundratals immunohistokemiska färgningar används för att identifiera olika tumörer och andra neoplasmer. Några få av de IHC-färgningar som används inom dermatologin anges nedan.
| IHC-färg | Användningar/Bildtext |
|---|---|
| BCL2 | Används för att skilja mellan basalcellskarcinom och trikoepitheliom |
| CD3 | T-cellmarkör; Starkt positiv i mycosis fungoides |
| CD4 | Helper T-cellmarkör |
| CD8 | Suppressort T-cellmarkör |
| Suppressor T-cellmarkör | .cellmarkör |
| CD20 | B-cellmarkör |
| CD30 | Kan användas vid diagnos av Hodgkinlymfom och anaplastiska lymfom. Stora celler: Golgiapparat och membranfärgning |
| CD31 | Hjälper till att identifiera endotelial tumör |
| CD34 | Detektiverar olika endoteliala tumörer och är positiv vid dermatofibrosarkom |
| CD56 | Används vid diagnostik av icke-Hodgkin-lymfom, leukemier och småcellscancer |
| CD117 | Marker för KIT-receptorn och positiv i olika tumörer, inklusive mastocytos |
| CDKN2A (p16) | Tumörsuppressormarkör som är positiv i HPV-associerade tumörer, aktiniska keratoser och skivepitelcancer |
| CK (olika) | Cytokeratiner kan användas för att hjälpa till att skilja godartade från maligna adnextumörer |
| CK 20 | Specifikt för Merkelcellscancer. Kan bidra till att identifiera adenokarcinom i mag-tarm- och reproduktionssystemet samt gastrointestinala epiteliala tumörer |
| Cytokeratin med hög molekylvikt | Används för att upptäcka duktala karcinom, skivepitelcancer och andra epiteliala neoplasmer |
| Desmin | Muskelmarkör |
| EMA | Används för att identifiera eckrina neoplasmer, Paget-sjukdom och talgkarcinom |
| Faktor 13 | Kan hjälpa kliniker att skilja mellan dermatofibrosarkom och dermatofibrom |
| HHHV8 | Humant herpesvirus 8 |
| HMB 45 | Används för att upptäcka melanocyter, särskilt vid melanom men negativ vid desmoplastiskt melanom |
| Melan-a | Kan hjälpa till att identifiera melanocytära naevusceller och melanom |
| PDL1 | Programmed death-ligand 1 |
| S-100 | Används för att markera tumörer av melanocyterna, både naevi och melanom |
| SMA | Smooth muscle antigen |
| SOX-10 | Nukleär markör för melanocytära tumörer |
| Treponema pallidum | Demonstrerar organismer vid sekundär syfilis |