Kemisk struktur för HEPES = N-(2-hydroxietyl)
piperazin-N’-
(2-etansulfonsyra)
piperazin-N’-
(2-etansulfonsyra)
HEPES är en vanlig buffertkemikalie som liknar Tris i Tris-HCl-buffer och fosfater i PBS. Buffertar används för att hålla pH-värdet på ett visst värde och kan ”buffra” tillsättningen av små mängder syror/baser.
Egenskaper hos HEPES
Stabilt pH-värde i förhållande till temperatur, inga primära amingrupper, ingen metallkelering, nära fysiologiskt pH-område. HEPES används ofta för att upprätthålla proteinlösligheten i biokemiska experiment.
- pKa vid 25C på 7,55 (7,31 vid 37C); (2:a pKa vid pH 3 är ointressant)
- användbart buffertområde på 6.8 till 8,2
- molekylvikt 238,3 g/mol
- ΔpKa/ΔT = -.014
- HEPES innehåller tertiära aminer som är reaktiva under vissa förhållanden.
- Kemisk formel: C8H18N2O4S; N-(2-hydroxietyl)-piperazin-N’-(2-etansulfonsyra); även känd som 4-(2-hydroxietyl)-1-piperazinetansulfonsyra; CAS-nummer: 7365-45-9
Buffertar är vanligen 1 M, som framställs genom att HEPES neutraliseras med natriumhydroxid. HEPES är i huvudsak olösligt tills det neutraliseras.
1M HEPES KOH buffert 7,5
- 700 ml ultrarent vatten
- 238.3 g HEPES
- KOH (kaliumhydroxid)-pellets för att justera pH till 7,5
- till 1 liter ultrarent vatten; sterilisera genom filtrering
1M HEPES-NaOH pH 7.5
- 700 ml ultrarent vatten
- 238,3 g HEPES
- ~5,5 g NaOH (natriumhydroxid) pellets för att justera pH till 7,5
- till 1 liter ultrarent vatten; steriliseras genom filtrering
Länkar
- original publikationer: Good’66 PMID 5942950, Good’74 PMID 4206745, Blanchard’84 PMID 6717292
- Wikipedia: buffertlösning
- CP: vanliga buffertar
- Lista över vanliga buffertar från Smith College