Abstract
Objektiv. At klarlægge effekten af Lactobacillus plantarum 299v på spytkortisol- og IgA-niveauerne i spyt hos unge voksne under eksamensstress. Design. Enogfyrre studerende med en forestående akademisk eksamen blev inkluderet i en randomiseret dobbeltblind, placebokontrolleret undersøgelse. De probiotiske bakterier eller placebo-produktet blev administreret i kapsler en gang om dagen i 14 dage. Der blev indsamlet spyt, og en test for opfattet stress blev udfyldt ved hver prøveudtagnings lejlighed. Der blev indsamlet spyt til kortisolanalyse ved hjælp af elektrokemiluminescensimmunoassay (ECLI), og spyt IgA blev analyseret ved hjælp af enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Lactobacillernes hyppighed blev vurderet ved dyrkning af spyt på selektivt medium, og identifikation af L. plantarum 299v blev foretaget på tilfældigt udvalgte kolonier ved hjælp af RAPD-typning (random amplification of polymorphic DNA). Resultater. Der blev fundet en signifikant forskel i kortisolniveauet mellem behandlingsgruppen og placebogruppen (), sammen med en signifikant stigning i niveauet af lactobaciller i behandlingsgruppen sammenlignet med placebogruppen (). Der blev ikke fundet nogen signifikante ændringer for spyt IgA. Konklusion. En probiotisk bakterie med evne til at reducere symptomer på irritabel tarmsyndrom (IBS) forbød øgede niveauer af stressmarkøren cortisol i undersøgelsesperioden. Undersøgelsens registreringsnummer er NCT02974894, og undersøgelsen er registreret på ClinicalTrials.gov.
1. Indledning
Der er en sammenhæng mellem fordøjelseskanalen og fysiologisk stress, og spytkortisol og spytimmunoglobulin A (spyt-IgA) kan tages som markører for stress . Kortisol er et steroidhormon, der frigives af binyrerne som reaktion på stress, og forhøjede niveauer er blevet sat i forbindelse med undertrykkelse af immunsystemet . IgA i spyt er en del af det orale immunforsvar og er det hyppigst forekommende antistof i spyt, overvejende i form af sekretorisk IgA . Mindre spytkirtler, der er placeret i hele mundslimhinden, udskiller ca. 30-35 % af al spyt IgA, der forekommer i hele spyttet hos voksne .
Probiotika er defineret som “levende mikroorganismer, der, når de indgives i passende mængder, giver værten en sundhedsmæssig fordel” . L. plantarum 299v har i tidligere undersøgelser vist en positiv effekt på symptomer på irritabel tarmsyndrom (IBS) såsom oppustethed og smerter . Denne stamme har også vist sig at modvirke utætheder i tarmene, hvilket igen kan dæmpe den hypothalamisk-hypofyse-nyrebarkagtige (HPA) akse reaktion på stress . Der er ikke tidligere gennemført undersøgelser af virkningen af L. plantarum 299v på stressrelaterede tilstande. Det er imidlertid blevet vist hos rotteunger, der var stresset af adskillelse fra deres mødre, at en probiotisk blanding af Lactobacillus rhamnosus R0011 og Lactobacillus helveticus R0052 signifikant nedsatte niveauerne af kortikosteron, kortisolanalogien, i dyrenes blod . Også rotter, der blev udsat for en akut tidsbegrænset stressor, blev mindre stressede efter behandling med Lactobacillus farciminis , sammen med nedsatte niveauer af lipopolysaccharider (LPS) i blodet .
Der vides ikke meget om virkningerne af probiotiske bakterier på stressmarkører i spyttet, på trods af at spytprøvetagning er en nem og ikke-invasiv metode, der ikke påfører forsøgspersonen nogen skade eller ubehag. Dette er især vigtigt ved evaluering af stressmarkører, hvor en akut stigning kan skyldes prøvetagningsmetoden og ikke den akutte stressfaktor, der evalueres i undersøgelsen. Når det drejer sig om probiotiske virkninger på IgA-niveauer i spyt, er de fleste undersøgelser relateret til forekomsten af forskellige luftvejsinfektioner , og i en tidligere undersøgelse blev det rapporteret, at de sekretoriske IgA-niveauer i afføring steg i en gruppe børn, der modtog et produkt indeholdende L. rhamnosus HN001 sammenlignet med en placebogruppe . Lignende resultater blev opnået med stammen L. rhamnosus GG .
Chronisk stress er relateret til forhøjede kortisolniveauer, men om kortisol er årsag til de fysiologiske stressreaktioner eller blot en konsekvens af dem er åben for diskussion . Frigivelsen af kortisol er et forsinket perifert svar på en akut stress, og det antydes, at kortisol udøver både stimulerende og undertrykkende virkninger på kroppens stressreaktion. Et eksempel på en stimulerende virkning er udløsningen af den kardiovaskulære aktivering ; men som reaktion på f.eks. en blødningsstressor undertrykker cortisol det nedsatte væskevolumenrespons ved at hæmme den indledende hurtige sekretion af vasokonstriktive stresshormoner . Med hensyn til cortisols immunregulerende egenskaber foreslås det, at dets sekretion beskytter mod den “overskridelse” af immunresponset, der ellers sker som reaktion på stress . Det er dog endnu ikke klart, hvilke formål det øgede kortisolniveau tjener under kroppens respons på stress .
I den foreliggende undersøgelse var hovedformålet at afklare effekten af den probiotiske bakterie Lactobacillus plantarum 299v på spytkortisolniveauet i spyt hos unge voksne under undersøgelsesstress. IgA i spyt fra mindre kirtler og i hele det menneskelige spyt blev målt som alternative markører for stress. Hypotesen var, at kortisolniveauet ville blive reduceret eller stabiliseret i testgruppen i forhold til placebogruppen, hvor kortisolniveauet forventedes at stige som følge af den eksamensinducerede stress. Derimod forventedes spyt IgA-niveauerne at stige i testgruppen i forhold til placebogruppen.
2. Materialer og metoder
2.1. Undersøgelsesdesign
I det foreliggende randomiserede, dobbeltblindede placebokontrollerede forsøg deltog frivillige studerende ved Lunds Universitet i alderen mellem 18 og 30 år i deres eksamensperiode. Eksklusionskriterier var graviditet samt indtagelse af antibiotika og midlertidig kortisonmedicinering i løbet af undersøgelsesperioden. Der blev foretaget en effektberegning for at bestemme antallet af forsøgspersoner, og 40 personer blev anset for at være tilstrækkeligt. 42 raske unge voksne meldte sig frivilligt til undersøgelsen, 28 kvinder og 14 mænd, og alle deltagere gav deres underskrevne informerede samtykke til undersøgelsen. Efter et mandligt frafald gennemførte 41 personer hele forsøgsperioden. 21 fik testproduktet i en daglig dosis på 1 1010 kolonidannende enheder af L. plantarum 299v i kapsler (L. plantarum 299v, kartoffelstivelse, hydroxypropylmethylcellulose og magnesiumstearat, (Probi AB, Lund, Sverige))), og 20 fik placebokapsler, der indeholdt de samme ingredienser som testproduktet med undtagelse af bakterierne. Inden forsøgsperioden startede, var der en to ugers wash-out-periode, hvor deltagerne blev instrueret om at undgå indtagelse af probiotiske produkter. Indtagelse af kapslen fandt herefter sted en gang om dagen efter frokost, og forsøgspersonerne blev bedt om ikke at spise, drikke, ryge eller tage snus i en time efter indtagelsen. Deltagerne blev også instrueret om enten at tygge på kapslen, indtil pulveret var opløst i munden (mindst 30 sekunder), eller tømme kapslen på en ske og tygge pulveret i 30 sekunder, inden de indtog den. Referenceprøverne for alle deltagerne blev indsamlet på dag 0, før indtagelse af produktet. Undersøgelsen fortsatte i 14 dage, og startdatoen blev individuelt fastsat for alle deltagerne inden for et tidsrum på 1,5 uger.
2.2. Psykologisk vurdering
En psykologisk vurdering blev inkluderet for at forsøgspersonerne kunne vurdere deres selvopfattede stress. Et spørgeskema med 30 spørgsmål udviklet af Levenstein et al. blev anvendt, og den opnåede lavere score indikerer en lavere grad af stress og omvendt. Et indeks, der giver et tal mellem 0 og 1, blev beregnet ved hjælp af følgende :
2.3. Spytprøvetagning
Mindre kirtelspyt blev indsamlet fra de nedre labiale slimhindeområder som beskrevet tidligere, og hele spyttet blev høstet på samme prøvetagningsdag. For at mindske påvirkningen fra cirkadiske variationer i spytsekretionen under indsamlingen blev alle prøver udtaget mellem kl. 15 og 17. Alle prøver blev indsamlet på dag 0 og dag 14, og på dag 5 og 10 blev der kun udtaget kortisolprøver på dag 5 og 10. Deltagerne blev instrueret om ikke at spise, drikke, tage snus, ryge, børste tænder eller dyrke nogen form for motion en time før prøveudtagningstidspunktet. Alkohol var også forbudt tolv timer før prøveudtagningstidspunktet.
2.4. Kortisolanalyse
Stikprøveudtagning af spyt til kortisolanalysen blev udført med en Salivette® til kortisol (Sarstedt, Tyskland), og den blev foretaget efter opsamling af spyt til IgA-analyse. Deltagerne blev instrueret om at cirkulere sumpen i munden i 2-5 min, indtil den var fyldt med spyt, hvorefter de forsigtigt spyttede den tilbage i røret. Rørene blev lagt på is og senere frosset ned ved -20 °C indtil analysen. Kortisolanalysen blev udført af Labmedicin Skåne (universitetets og de regionale laboratorier i Region Skåne, Sverige) og blev udført i henhold til akkreditering. Den anvendte metode var et konkurrencetest i ét trin med detektionsteknikken Electrochemiluminescence Immunoassay (ECLI) baseret på ruthenium (Ru)-derivat .
2.5. Spyt IgA-analyse
Mindre kirtelspyt blev opsamlet fra underlæben ved hjælp af en SialoPaper®-strimmel (Oraflow Inc., New York, USA) og forsigtigt placeret på slimhinden i 60 s, og spytmængden inden for strimlen blev målt med en Periotron® 8000 (Oraflow Inc., New York, USA). SialoPaper-strimlen blev lagt i 1 mL PBS (1,5 mL PP, Sarstedt, Tyskland; Phosphate Buffered Saline, Dulbecco A, Oxoid, England) på is og opbevaret ved -80 °C indtil analysen. Det ustimulerede hele spyt blev indsamlet efter prøveudtagning af spyt fra de mindre kirtler. Deltagerne sad, lænede sig let fremad og lod spyttet løbe ud i et 2 mL mikrorør ved hjælp af et sterilt sugerør (sterile engangspipetter på 1 mL, Kemikalia, Sverige; 2 mL PP, Sarstedt, Tyskland). Alle prøver blev opbevaret ved -80 °C indtil analysen.
Koncentrationen af IgA, der udskilles i spyttet, er relativ til den samlede proteinmængde, og derfor er enheden % IgA/total protein valgt til at repræsentere resultatet af analysen af hele spyttet. Dette er relevant, da IgA-sekretionen ændrer sig i takt med spytgennemstrømningen, som igen ændrer sig med stimuli på det autonome nervesystem, f.eks. akut stress, kronisk stress og hvile. Der tages højde for denne ændring i flowhastigheden ved at måle % IgA/total protein i spyt, hvilket gør det til en præcis metode, når man sammenligner data fra forskellige forsøgspersoner .
For at analysere spytets IgA-koncentration blev der udført en modificeret sandwich-ELISA i henhold til Krzywkowski et al. , idet der blev anvendt α1- og α2-kædespecifik gedebuk anti-human IgA (5 μg/mL, Sigma I0884; Sigma Chemical Co, St Louis, MO, USA) konjugeret til alkalisk fosfatase (Sigma A9669; fortyndet 1 : 30.000 i PBST). Den samlede proteinkoncentration blev analyseret ved hjælp af en quick start protein assay (BIO-RAD) .
Den spytagtige IgA i spyt fra den mindre kirtel blev udtrykt som mg/100 mL. Analysen af spyt-IgA blev udført på det odontologiske fakultet ved Malmø Universitet (Malmø, Sverige).
2.6. Pladetælling af lactobaciller
For at analysere de orale lactobaciller tyggede forsøgspersonerne på en paraffinpille (Orion Diagnostics) for at stimulere spytsekretionen, og opsamlingen blev foretaget på samme måde som for spyt-IgA i hele spyt. Indsamlingen af denne spytprøve blev foretaget i slutningen af hver prøveudtagning, da denne prøveudtagningsmetode i modsætning til de andre metoder giver stærkt stimuleret spyt. Rørene blev lagt på is, og 0,25 mL af spytprøven blev overført til et andet sterilt mikrorør (1,5 mL PP, Sarstedt, Tyskland), som indeholdt 0,5 mL frysemedie. Begge rør blev opbevaret ved -80 °C indtil analysen.
Antallet af lactobaciller blev vurderet ved hjælp af pladetælling. Prøverne blev fortyndet og spredt på Rogosa agarplader (Oxoid, England), og pladerne blev inkuberet ved 37°C i 72 timer under anaerobe forhold (2,5 L, AnaeroGen™, Oxoid). To kolonier fra hver plade blev tilfældigt udvalgt og rekultiveret. Isolaterne blev frosset ned og opbevaret i frysemedier ved -80°C.
2.7. Identifikation af L. plantarum 299v
Til DNA-ekstraktion af hvert isolat blev prøverne optøet og hvirvlet kort før tilsætning af 1 mL sterilt MilliQ-vand og centrifugering ved maksimal hastighed (14 800 g, 1 min). Supernatanten blev fjernet, og der blev tilsat yderligere 0,25 mL sterilt MilliQ-vand. Det resterende celleekstrakt blev jævnt formalet med sterile Assistent®-glasperler (Ø 2 mm, Glaswarenfabrik Karl Hecht, Tyskland) i en shaker (6 °C, 30 min), og alle prøver blev derefter anvendt i en RAPD-reaktion (random amplification of polymorphic DNA) for at undersøge forekomsten af L. plantarum 299v. Der blev fremstillet en masterblanding til 35 prøver, herunder 175 μL buffer (Qiagen, Tyskland), 35 μL dNTP (Roche Diagnostics, Tyskland), 35 μL primer 73 (Qiagen, Tyskland) og 8,75 μL Taq-polymerase (Qiagen, Tyskland). 7,25 μL af mastermixen blev tilsat til hvert PCR-rør (Gene Amp 0,5 mL, Applied Biosystems, Singapore) sammen med 42,75 μL H2O og 1 μL af supernatanten fra prøverne.
RAPD-reaktionen blev udført i en PCR-maskine (Perkin Elmer, DNA Thermal Cycler, USA) i henhold til Quednau et al. Geler til gelelektroforese blev fremstillet ved at tilsætte 0,75 g Agarose DNA Grade Electran® (VWR, Belgien) i 50 mL TB-buffer; derefter blev opløsningen opvarmet til kogepunktet og hældt i geltanke til afkøling. Gelerne blev til sidst anbragt i gelbakker med TB-buffer. 2-5 μL af hver prøve blev tilsat i hver brønd sammen med 3 μL loadingbuffer, før elektroforese blev udført (100 V, 1 time). Gel Redx3 (Biotium Inc., USA), 1 mL i 99 mL dH2O, blev anvendt i 20 min til at farve gelerne, og der blev taget billeder i henhold til Quednau et al. .
2.8. Statistiske beregninger
Dataene blev statistisk evalueret ved hjælp af en Kruskal-Wallis envejsanalyse af varians (ANOVA) på rækker eller en Mann-Whitney Ranksummetest, når det var relevant. Der blev anvendt A -test til parvis sammenligning af de absolutte IgA-koncentrationer samt af de absolutte kortisolniveauer. De statistiske værktøjer var Sigma Plot (11.0 og 12.0) og Excel 2013. Desuden blev der foretaget en incidensprøve vedrørende forekomsten af L. plantarum 299v med Fisher Exact-test ved hjælp af QuickStat (2.6). Dataene blev præsenteret som median og interkvartilområde samt som gennemsnit og standardafvigelse. Minimums- og maksimumsværdierne for kortisolprøverne blev slettet for at fjerne virkningen af outliers, da der kunne ses en klar afvigelse i dataene. Dette vedrørte kun kortisolprøverne. Der blev kontrolleret for værdier fra deltagere, der ikke opfyldte alle undersøgelseskravene, og der blev ikke fundet afvigelser. Deres resultater blev derfor medtaget.
2,9. Etisk tilladelse
Undersøget blev godkendt af det regionale etiske granskningsudvalg i Lund (Ref. 2013/166), og de etiske overvejelser omfattede fordele og risici ved det anvendte produkt og muligheden for allerede eksisterende personlige relationer mellem det ansvarlige testpersonale og de testpersoner, der gennemførte undersøgelsen.
3. Resultater
3.1. Evaluering af den psykologiske vurdering
Den psykologiske vurdering viste ingen signifikant forskel i opfattet stress mellem grupperne, og der var desuden ingen signifikant forskel inden for hver gruppe, når man sammenlignede de forskellige prøvetagningsdage.
3.2. Kortisolniveauer i spyt
De absolutte kortisolniveauer (nM) på referencedagen (dag 0) var 9,18 (±2,50) for placebogruppen og 9,47 (±2,96) for testgruppen, uden signifikant forskel mellem de to grupper (). Da den relative ændring i mediankortisolniveauerne blev sammenlignet med en referenceværdi på dag 0 (baseline), blev der fundet en signifikant forskel mellem grupperne på dag 10 (; Figur 1). Der blev ikke fundet nogen signifikans inden for grupperne.
3.3. IgA-koncentrationer i spyt
De absolutte IgA-niveauer (mg/100 mL) i spyt fra den mindre kirtel på referencedagen (dag 0) var 1,99 (±3,76) for placebogruppen og 4,80 (±9,17) for testgruppen, uden signifikant forskel mellem de to grupper (). De absolutte IgA-niveauer (% IgA/total protein) i hele spyttet på referencedagen (dag 0) var 25,3 (±7,37) for placebogruppen og 27,1 (±12,2) for testgruppen, uden signifikant forskel mellem de to grupper (). I modsætning til de ændrede kortisolniveauer blev medianen af spytkoncentrationerne af IgA i hele spyt eller spyt fra de mindre kirtler ikke påvirket af probiotikaforbruget; det vil sige, der blev ikke vist nogen signifikant forskel mellem probiotikagruppen og placebogruppen (figur 2 og 3, hhv.).
3.4. Levende antal lactobaciller og identifikation af L. plantarum 299v
På dag 14 var der en signifikant stigning i mængden af lactobaciller i spyttet hos de forsøgspersoner, der indtog probiotika, i forhold til dem, der fik placebo-produktet (). Stigningen var også signifikant () inden for den probiotiske gruppe, når man sammenlignede baseline med den sidste prøvetagningsdag (, Figur 4). Forekomsten af isolater identificeret som L. plantarum 299v var signifikant øget på dag 14 hos personer med påviselige niveauer af lactobaciller, både sammenlignet med placebogruppen og med baseline ().
4. Diskussion
De fleste deltagere havde deres eksamen inden undersøgelsens afslutning, hvilket resulterede i et tilsyneladende, men ikke signifikant (), højdepunkt af opfattet stress på dag 10 for placebogruppen. Dette falder sammen med toppen af spytkortisolkoncentrationen i spytkortisolkoncentrationen i placebogruppen på dag 10 (figur 1). I modsætning hertil blev der ikke set nogen top i den probiotiske gruppe, hvilket tyder på, at det probiotiske indtag havde en effekt på stress set som udskillelse af kortisol fra binyrerne. På dag 14 havde mange af de frivillige afsluttet deres eksamen, og der kunne derfor forventes et fald i kortisol, da kortisol reagerer relativt hurtigt på akutte stressorer.
Akademisk stress, her i form af en eksamensperiode, kan ikke betragtes som kronisk stress, da deltagerne kan se en afslutning på den stressende periode. Det foreslås derfor, at akademisk stress minder mere om akut stress med hensyn til stressreaktion. Kortisolniveauerne i den foreliggende undersøgelse var i samme størrelsesorden som det, der tidligere er rapporteret for akut stress .
Kronisk stress er forbundet med en vedvarende øget udskillelse af kortisol. Det er for nylig debatteret, om det er de faktiske øgede niveauer af kortisol eller snarere hvordan målvævene reagerer på de øgede niveauer, der er årsagen til mange sygdomme og symptomer forbundet med kronisk stress . Det vides, at en langvarig stigning i blodsukkeret kan føre til muskelødelæggelse, fedtophobning og -omfordeling og eventuelt diabetes. Derfor kunne et muligt mål for probiotika være kronisk stressede personer, hvor de vedvarende forhøjede niveauer af cortisol øger deres risiko for at udvikle sygdomme forbundet med kronisk stress .
Der er generelt store individuelle forskelle i de målte niveauer af spyt IgA, hvilket forplumrer forsøg på at se forskelle mellem små grupper af individer. Medianværdierne i de forskellige grupper svarer dog godt til dem, der er rapporteret af andre . De foreliggende resultater fra de hele spytprøver viste, at værdierne mellem placebo- og testgruppen ikke adskilte sig signifikant fra hinanden, og at medianværdierne i begge grupper var ens. Hvis man ser på den relative ændring i hver gruppe, var medianværdien lidt positiv for probiotikagruppen, mens den var lidt negativ i placebogruppen. Sammenligner man med 25. og 75. percentiler, ses en stigning i en stor del af de påviste spyt IgA-niveauer i placebogruppen, hvilket gør det svært at drage nogen konklusioner (figur 2). Stressorer, der forårsager kronisk stress, er blevet forbundet med nedsatte niveauer af spyt IgA , mens akut stress er blevet vist at øge niveauerne , hvilket indikerer en aktivering af immunresponset. Det kunne derfor antydes, at stressoren i denne undersøgelse er mere sandsynligt, at den er akut end kronisk.
Forrige undersøgelser har vist en tendens, der tyder på, at probiotika kan øge spyt IgA-niveauerne under stress . Testpersonerne i denne undersøgelse havde imidlertid kun indtaget probiotika i en to ugers periode, og selv om der var et signifikant højere niveau af lactobaciller i denne gruppe, kan det muligvis være, at undersøgelsesperioden var for kort til at se klare ændringer på individuelt niveau. På grund af de store individuelle forskelle i spyt IgA-niveauet ville det også have været ønskeligt med et større antal deltagere i hver gruppe.
Det viste sig, at spyt IgA-niveauet i spyt i den mindre kirtelspyt er højere end rapporteret af andre, hvilket kan skyldes individuelle forskelle eller skyldes undersøgelsesdesignet i dette arbejde. For eksempel blev der anvendt et bestemt stressniveau og en bestemt stresstype på deltagerne, hvilket ikke blev anvendt i undersøgelsen udført af Sonesson et al. . Dataene fra den mindre kirtelspyt viste, at medianværdierne var højere i testgruppen end i placebogruppen, men forskellen mellem grupperne var ikke signifikant. Stigningen synes at være større i den gruppe, der fik probiotika, sammenlignet med placebogruppen, men den relative ændring i medianværdien er omtrent den samme i de to grupper. Fejlbjælkerne indikerer dog store variationer inden for gruppen, der fik probiotika, hvilket kan forklare modsigelsen (figur 3).
Kort naturalistisk stress, herunder akademisk stress, forventes at ligge et sted mellem akut og kronisk stress med hensyn til stigning eller fald i stressmarkører. Da stressoren er svær at definere med hensyn til den type stress, der anvendes, og da den individuelle stress, der blev anvendt på hver enkelt deltager, kan have været forskellig, er de ubetydelige forskelle, der blev fundet, i overensstemmelse med teorien for, hvordan IgA kan afspejle stress. Det kunne have været lettere at observere ændringer i spyt-IgA, hvis undersøgelsesperioden havde været længere, eller hvis der var blevet indsamlet yderligere prøver en eller to uger efter undersøgelsen, da IgA-niveauerne også er blevet set falde et stykke tid efter den oplevede stress i andre undersøgelser . En anden forklaring kunne være, at selv om deltagerne blev bedt om at notere eventuelle ændringer i deres helbredstilstand (f.eks. forkølelsestilfælde), blev der ikke kontrolleret for dette, og det blev heller ikke sammenlignet med udslag i spyt-IgA-dataene. Forkølelse og andre luftvejsinfektioner ville sandsynligvis forårsage en stigning i spyt-IgA, da IgA er en del af immunsystemets første forsvarslinje mod patogener.
Der var en signifikant stigning i niveauerne af lactobaciller for den probiotiske gruppe, også i forhold til placebogruppen, hvilket viser, at de administrerede bakterier kunne overleve i mundhulen (Figur 4). Dette blev også understøttet af resultatet af RAPD-typningen, der indikerede forekomsten af L. plantarum 299v i de prøver, hvor niveauerne af lactobaciller lå over detektionsgrænsen. Der synes således at være en sammenhæng mellem den øgede tilstedeværelse af de probiotiske bakterier og de nedsatte kortisolniveauer i spyt.
5. Konklusioner
Der er en signifikant forskel i kortisoludskillelsesresponset mellem forsøgspersoner, der fik probiotika eller placebo, muligvis i forbindelse med stress. Der blev desuden set en signifikant stigning i niveauet af lactobaciller for probiotikagruppen i forhold til placebogruppen. Derimod blev der ikke fundet nogen signifikans for spyt IgA.
Konkurrerende interesser
Irini Lazou Ahrén er ansat hos Probi AB. Produktet og placebokapsler blev stillet til rådighed af Probi AB. Ingen andre konkurrerende interesser skal rapporteres.
Autors’ Contributions
De to første forfattere, Hannah Andersson og Cecilia Tullberg, har bidraget ligeligt til denne artikel, og førsteforfatterskabet er delt.
Acknowledgments
Forfatterne takker Jie Xu og Marie Kala, Lunds Universitet, for laboratoriehjælp.