Hvad er immunohistokemi?
Immunohistokemi (IHC) anses for at være en avanceret form for histopatologi. Immunohistokemi anvendes normalt ikke i første omgang, men tilføjes, når rutinemæssige/regelmæssige histologiske undersøgelser ikke er tilstrækkelige til at stille en diagnose.
IHC anvender primære antistoffer til at markere et protein, hvorefter der anvendes et sekundært antistof, som er bundet til det primære antistof. Ved immunoperoxidasefarvning bindes et antistof til et enzym, peroxidase, som katalyserer en reaktion, hvor proteinet specifikt farves brunt. IHC kan også involvere fluorescerende mærket antistof, således at der, når det ses i et lysmikroskop, observeres et bestemt mønster ud fra den udsendte fluorescens.
IHC-mønsteret betragtes som diagnostisk, idet det påviser nukleare, membranøse eller cytoplasmatiske mønstre. IHC anvendes ofte i situationer, hvor tilstedeværelse eller fravær af visse proteiner kan danne grundlag for en diagnose. Det kan også bruges til at skelne mellem to forskellige sygdomsprocesser, der ellers kan se ens ud for patologen.
Hvordan udføres immunohistokemi?
Den mest almindelige proces til fremstilling af immunohistokemiske objektglas er som følger:
- Fiksering af vævet (generelt fikseres IHC-farvninger med formalin)
- Indlejring af vævet (i paraffin)
- Sektionering af vævene
- Fremkaldelse (sker ved anvendelse af varme eller proteolytiske enzymer)
- Montering og dehydrering
- Klargøring og observation af objektglassene.
Hvilke fordele og ulemper er der ved immunohistokemi?
Fordelene ved IHC omfatter:
- Det er muligt at anvende friske eller frosne vævsprøver til IHC.
- IHC er veletableret og let tilgængelig.
- Oprisen for IHC er relativt lav
- Det har en hurtig gennemløbstid.
- Da der ikke er tale om levende smittefremkaldende agenser, er risikoen for menneskers sundhed minimal.
Ulemperne ved IHC er følgende:
- IHC-farver er ikke standardiseret på verdensplan.
- Mens omkostningerne ved proceduren er relativt billige, er det udstyr, der er nødvendigt for at udføre IHC, dyrt.
- Kvantificering af resultaterne er vanskelig.
- IHC er udsat for menneskelige fejl. Veluddannet personale er altafgørende.
Hvad er nogle eksempler på immunohistokemiske farvestoffer?
Hundredvis af immunohistokemiske farvestoffer anvendes til at identificere forskellige tumorer og andre neoplasmer. Nedenfor er blot nogle få af de IHC-farvninger, der anvendes inden for dermatologi, anført.
| IHC-farve | Anvendelser/Billedtekst | |
|---|---|---|
| BCL2 | Anvendes til at skelne mellem basalcellekarcinomer og trichoepitheliomer | |
| CD3 | T-cellemarkør; stærkt positiv i mycosis fungoides | |
| CD4 | Hjælper T-cellemarkør | |
| CD8 | Suppressor T-cellemarkør | |
| CD20 | B-cellemarkør | |
| CD30 | Kan anvendes ved diagnosticering af Hodgkin-lymfom og anaplastiske lymfomer. Store celler: Golgiapparat og membranfarvning | |
| CD31 | Hjælper til at identificere endothelial tumor | |
| CD34 | Underskiller forskellige endotheliale tumorer og er positiv i dermatofibrosarcoma | |
| CD56 | Anvendes ved diagnosticering af ikkeHodgkin-lymfomer, leukæmier og småcellede karcinomer | |
| CD117 | Marker for KIT-receptor og positiv i forskellige tumorer, herunder mastocytose | |
| CDKN2A (p16) | Tumorsuppressormarkør, positiv i HPV-associerede tumorer, aktiniske keratoser og pladecellekarcinom | |
| CK (forskellige) | Cytokeratiner kan anvendes til at hjælpe med at skelne benigne fra maligne adnexaltumorer | |
| CK 20 | Specifikt for Merkelcellekarcinom. Kan hjælpe med at identificere adenokarcinomer i mave-tarm- og reproduktionssystemet samt gastrointestinale epitheltumorer | |
| Cytokeratin med høj molekylvægt | Anvendes til at påvise duktale carcinomer, pladecellekarcinomer og andre epitheliale neoplasmer | |
| Desmin | Muskulær markør | |
| EMA | Anvendes til at identificere ekkrine neoplasmer, Paget-sygdom og talgkarcinomer | |
| Faktor 13 | Kan hjælpe klinikere med at skelne mellem dermatofibrosarcoma og dermatofibromer | |
| HHHV8 | Human herpesvirus 8 | |
| HMB 45 | Anvendes til påvisning af melanocytter, især i melanom, men negativ i desmoplastisk melanom | |
| Melan-a | Kan hjælpe med at identificere melanocytære naevusceller og melanomer | |
| PDL1 | Programmed death-ligand 1 | |
| S-100 | Bruges til at markere tumorer af melanocytter, både naevi og melanom | |
| SMA | Smooth muscle antigen | |
| SOX-10 | Nuklear markør for melanocytære tumorer | |
| Treponema pallidum | Demonstrerer organismer i sekundær syfilis |