HEPES

Kemisk struktur for HEPES = N-(2-hydroxyethyl)
piperazin-N’-
(2-ethansulfonsyre)

HEPES er et almindeligt bufferstof, der svarer til Tris i Tris-HCl-puffere og fosfater i PBS. Buffere bruges til at holde pH-værdien på en bestemt værdi og kan “puste” ved tilsætning af små mængder af syrer/baser.

Egenskaber ved HEPES

Stabil pH-værdi i forhold til temperatur, ingen primære aminegrupper, ingen metalchelation, nær fysiologisk pH-område. HEPES anvendes ofte til at opretholde proteinopløseligheden i biokemiske eksperimenter.

• pKa ved 25C på 7,55 (7,31 ved 37C); (2. pKa ved pH 3 er ikke af interesse)
• brugeligt bufferområde på 6.8 til 8,2
• molekylvægt 238,3 g/mol
• ΔpKa/ΔT = -,014
• HEPES indeholder tertiære aminer, som er reaktive under visse betingelser.
• Kemisk formel: C8H18N2O4S; N-(2-hydroxyethyl)-piperazin-N’-(2-ethansulfonsyre); også kendt som 4-(2-hydroxyethyl)-1-piperazinethansulfonsyre; CAS-nummer: 7365-45-9

Buffere er typisk 1 M, fremstillet ved neutralisering af HEPES med natriumhydroxid. HEPES er i det væsentlige uopløseligt, indtil det er neutraliseret.

1M HEPES KOH buffer 7,5

• 700 ml ultrarent vand
• 238.3 g HEPES
• KOH (kaliumhydroxid)-piller til justering af pH til 7,5
• til 1 l ultrarent vand; steriliseres ved filtrering

1M HEPES-NaOH pH 7.5

• 700 ml ultrarent vand
• 238,3 g HEPES
• ~5,5 g NaOH (natriumhydroxid) pellets til justering af pH til 7,5
• til 1L w ultrarent vand; steriliseres ved filtrering

Links

• originalpublikationer: Good’66 PMID 5942950, Good’74 PMID 4206745, Blanchard’84 PMID 6717292
• Wikipedia: bufferopløsning
• CP: almindelige buffere
• Liste over almindelige buffere fra Smith College