Bloodborne Agents
Mycoplasma haemofelis (Mhf), ”Candidatus Mycoplasma haemominutum” (Mhm) ja ”Candidatus M. turicensis” (Mtc) – näitä kaikkia voi esiintyä kissoissa. Kokeellisesti tartunnan saaneissa kissoissa Mhf on ilmeisesti patogeenisempi kuin Mhm. Vaikuttaa siltä, että Mtc on patogeenisuudeltaan välimuoto. Diagnoosi perustuu organismin osoittamiseen erytrosyyttien pinnalla ohutta verikalvoa tutkittaessa tai PCR-määrityksellä. Organismien määrä vaihtelee, joten verikalvotutkimus voi olla virheellisesti negatiivinen jopa 50 prosentissa tapauksista. Organismia voi olla vaikea löytää sytologisesti, erityisesti kroonisessa vaiheessa. Näin ollen PCR-määritykset ovat herkkyyden vuoksi ensisijaisia testejä.13 Saatavilla on alukkeita, joilla voidaan monistaa kaikki kolme hemoplasmaa. Reaaliaikaisia PCR-määrityksiä voidaan käyttää kopiomäärien seurantaan hoidon aikana ja sen jälkeen, mutta niillä ei ole suurempaa herkkyyttä, spesifisyyttä tai ennustearvoa kuin perinteisillä PCR-määrityksillä.32 PCR-määrityksiä olisi harkittava arvioitaessa kissoja, joilla on selittämätöntä kuumetta tai anemiaa ja jotka ovat sytologisesti negatiivisia. Lisäksi American College of Veterinary Internal Medicine (ACVIM) suosittelee, että verenluovuttajina käytettävät kissat seulotaan hemoplasmojen varalta PCR-testeillä.35 Monet kissat (noin 15 %) ovat suhteellisen epäpatogeenisen Candidatus M. haemominutum -bakteerin kantajia, joten positiiviset testitulokset eivät välttämättä aina korreloi taudin esiintymisen kanssa (huono PPV).
Kissat voivat saada tartunnan E. canis -tyyppisistä organismeista2 ja Anaplasma phagocytophilum -bakteerista.15 Muista näihin sukuihin kuuluvista taudinaiheuttajista tiedetään vain vähän, kun kyseessä ovat kissat. Koska organismit kuuluvat eri sukuihin, serologinen ristireaktiivisuus vaihtelee. Vaikka kliiniset oireyhtymät voivat olla samankaltaisia, ei ole olemassa yhtä serologista testiä infektion dokumentoimiseksi, eikä kissoille ole tällä hetkellä olemassa standardoitua serologiaa. Lisäksi jotkut kissat, joilla on E. canis -infektio, eivät serokonvertoidu, joten PCR-testi on parempi kuin serologia kissoilla. PCR-määritykset voidaan suunnitella monistamaan kutakin organismia. Vaihtoehtoisesti on saatavilla alukkeita, joilla voidaan monistaa kaikki organismit yhdessä reaktiossa, minkä jälkeen voidaan käyttää sekvensointia tartuntalajin määrittämiseksi. Positiiviset testitulokset eivät kuitenkaan aina korreloi taudin esiintymisen kanssa. Anaplasma phagocytophilum -DNA:ta on monistettu terveiden kissojen verestä yli 10 viikkoa sen jälkeen, kun kokeellinen tartunta oli saatu altistumalla Ixodes-punkille (MR Lappin, julkaisematon tieto, 2011).
Kissat voivat saada tartunnan Rickettsia felis -bakteerista, ja niillä on osoitettu olevan vasta-aineita R. rickettsii -bakteeria vastaan. Kuume, päänsärky, myalgia ja makulaarinen ihottuma ihmisillä on yhdistetty R. felis -infektioon useissa maissa eri puolilla maailmaa. Laboratoriossamme hiljattain tehdyssä tutkimuksessa testasimme 92 paria kissan veri- ja kirppuuutteita Alabamasta, Marylandista ja Texasista käyttäen PCR-määrityksiä, jotka monistavat sitraattisyntaasigeenin (gltA) ja ulomman membraaniproteiinin B-geenin (ompB) aluetta. Näistä 92 parista 62 kirppuuutetta 92:sta (67,4 %) eikä yksikään kissan verinäytteistä ollut positiivinen R. felis -DNA:n suhteen.11 Eräässä toisessa tutkimuksessa osoitimme, että R. felis- ja R. rickettsii -vasta-aineiden esiintyvyysluvut kuumetta sairastavilla kissoilla olivat 5,6 % ja 6,6 %, mutta kumpaakaan organismia ei ollut monistettu verestä.1 Nämä tulokset todistavat, että kissat altistuvat ajoittain altistumiselle altistumiselle, mutta tautien yhteyksien merkityksellisyyden selvittämiseksi tarvitaan lisää tietoja. Ei tiedetä, onko Rickettsia spp. PCR-määritykset tällä hetkellä tarkoitettu käytettäväksi kissoilla.
Veriviljelyä, PCR-määritystä verestä ja serologisia testejä voidaan käyttää yksittäisten kissojen arvioimiseksi Bartonella spp. -tartunnan varalta.3 Kissat, jotka ovat viljelynegatiivisia tai PCR-negatiivisia ja vasta-aineiden suhteen negatiivisia, ja kissat, jotka ovat viljelynegatiivisia tai PCR-negatiivisia ja vasta-aineiden suhteen positiivisia, eivät luultavasti ole kirppu-, kissa- tai ihmistartunnan lähde. Bakteremia voi kuitenkin olla ajoittaista, ja vääriä negatiivisia viljely- tai PCR-tuloksia voi esiintyä, mikä rajoittaa yhden testipatteriston ennakoivaa arvoa.17 Vaikka serologista testausta voidaan käyttää sen määrittämiseen, onko yksittäinen kissa altistunut, sekä seropositiiviset että seronegatiiviset kissat voivat olla bakteeriperäisiä, mikä rajoittaa serologisen testauksen diagnostista hyödyllisyyttä. Näin ollen terveiden kissojen testaamista Bartonella-lajin tartunnan varalta ei tällä hetkellä suositella.3,14 Testaus olisi varattava kissoille, joilla epäillään kliinistä bartonelloosia. Koska Bartonella spp. infektio on niin yleinen terveillä kissoilla, edes viljelypositiiviset tai PCR-positiiviset tulokset eivät todista kliinistä bartonelloosia. Vaikka esimerkiksi havaitsimme Bartonella spp. DNA:ta useammassa kissassa, jolla oli kuumetta, kuin paritetuissa kissoissa, joilla ei ollut kuumetta, terveet kissat olivat silti yleisesti positiivisia.16 Yhdistetty serologia ja PCR-menetelmä arvioitaessa kissoja, joilla epäillään bartonelloosia, antavat todennäköisesti parhaan ennustearvon.
Cytauxzoon felis tunnistetaan tavallisesti helposti kliinisesti sairaita kissoja arvioitaessa sytologisessa tutkimuksessa, joka tehdään verestä otetuista preparaateista tai pernanäytteistä. Serologisia testejä ei ole tällä hetkellä kaupallisesti saatavilla. PCR:llä voidaan monistaa organismin DNA:ta sellaisten kissojen verestä, jotka ovat sytologisesti negatiivisia.9
Kissan immuunikatoviruksen (FIV) vasta-aineet havaitaan seerumista kliinisessä käytännössä useimmiten entsyymivälitteisellä immunosorbenttimäärityksellä (ELISA). Eri testien vertailu on osoittanut, että useimpien määritysten tulokset ovat vertailukelpoisia.10 Verestä tehdyn viruksen eristyksen tai RT-PCR:n tulokset ovat positiivisia joillakin vasta-aineiden suhteen negatiivisilla kissoilla. ELISA-testissä voi esiintyä vääriä positiivisia reaktioita, joten terveiden tai matalan riskin kissojen positiiviset ELISA-tulokset olisi varmistettava Western blot -immunomäärityksellä. Kissanpennuilla voi olla havaittavissa ternimaidosta peräisin olevia vasta-aineita useiden kuukausien ajan. Jos vasta-aineita esiintyy vielä 6 kuukauden iässä, kissanpentu on todennäköisesti saanut tartunnan. Viruksen eristäminen tai RT-PCR verestä voidaan myös suorittaa tartunnan vahvistamiseksi. FIV:tä ei kuitenkaan esiinny veressä suuria määriä, joten väärän negatiiviset tulokset ovat yleisiä. Lisäksi tulokset vaihtelevat laboratorioiden välillä.6
Useimmat kissojen leukemiavirusinfektiota sairastavat kissat ovat viremisiä, joten molekyylidiagnostisia määrityksiä ei yleensä tarvita kliinisessä käytännössä. Uudempien herkkien reaaliaikaisten PCR-määritysten käyttöä on kuitenkin käytetty infektiovaiheiden tarkkaan kuvaamiseen.19 Näitä määrityksiä ei kuitenkaan ole yleisesti saatavilla kaupallisesti.
Sekä FIPV:n että FECV:n RNA:ta voidaan monistaa kissojen verestä, joten positiiviset testitulokset eivät aina korreloi FIP:n kehittymisen kanssa. M-geenin mRNA:n monistaminen RT-PCR:llä tuotti vaihtelevia tuloksia kahdessa tähän mennessä tehdyssä tutkimuksessa. Toisessa tutkimuksessa 13 kissaa 26:sta näennäisesti normaalista kissasta oli positiivinen FECV:n mRNA:n suhteen veressä, mikä viittaa siihen, että tämän määrityksen positiivinen ennustearvo FIP:n diagnosoinnissa oli alhainen.5
.