Mitä immunohistokemia on?
Immunohistokemiaa (IHC) pidetään kehittyneenä histopatologian muotona. Immunohistokemiaa ei yleensä käytetä aluksi, vaan se lisätään, kun rutiininomainen/säännöllinen histologinen tutkimus ei riitä diagnoosin muodostamiseen.
IHC:ssä käytetään primaarivasta-aineita proteiinin merkitsemiseen, minkä jälkeen käytetään sekundaarivasta-ainetta, joka on sitoutunut primaarivasta-aineeseen. Immunoperoksidaasivärjäyksessä vasta-aine liitetään entsyymiin, peroksidaasiin, joka katalysoi reaktion, jossa proteiini värjäytyy spesifisesti ruskeaksi. IHC:ssä voidaan käyttää myös fluoresoivasti leimattua vasta-ainetta, jolloin valomikroskoopilla tarkasteltuna emittoituneesta fluoresenssista havaitaan tietty kuvio.
IHC-kuviota pidetään diagnostisena, ja siinä osoitetaan ydin-, kalvo- tai sytoplasmakuvioita. IHC:tä käytetään usein tilanteissa, joissa tiettyjen proteiinien läsnäolo tai puuttuminen voi muodostaa perustan diagnoosille. Sitä voidaan käyttää myös erottamaan toisistaan kaksi erilaista tautiprosessia, jotka saattavat muuten vaikuttaa patologin silmissä samankaltaisilta.
Miten immunohistokemia suoritetaan?
Yleisin immunohistokemiallisten preparaattien valmistusprosessi on seuraava:
- Kudoksen fiksointi (yleensä IHC-värjäykset fiksoidaan formaliinilla)
- Kudoksen sulattaminen (parafiiniin)
- Kudosten leikkeleminen
- Kudosten talteenotto (tehdään lämpöä tai proteolyyttisiä entsyymejä käyttämällä)
- Kiinnittäminen ja dehydraatio
- Diojen puhdistaminen ja havainnointi.
Mitkä ovat immunohistokemian edut ja haitat?
IHC:n etuja ovat:
- IHC:ssä voidaan käyttää tuoreita tai pakastettuja kudosnäytteitä.
- IHC on vakiintunut ja helposti saatavilla.
- IHC:n kustannukset ovat suhteellisen alhaiset
- Nopea läpimenoaika.
- Koska siihen ei liity eläviä tartunnanaiheuttajia, riski ihmisten terveydelle on vähäinen.
IHC:n haitat ovat seuraavat:
- IHC-värjäyksiä ei ole standardoitu maailmanlaajuisesti.
- Menetelmän kustannukset ovat suhteellisen edulliset, mutta IHC:n suorittamiseen tarvittavat laitteet ovat kalliita.
- Tulosten kvantifiointi on vaikeaa.
- IHC:ssä voi tapahtua inhimillisiä virheitä. Hyvin koulutettu henkilökunta on ensiarvoisen tärkeää.
Mitä esimerkkejä immunohistokemiallisista värjäyksistä?
Satoja immunohistokemiallisia värjäyksiä käytetään erilaisten kasvainten ja muiden kasvainten tunnistamiseen. Alla on lueteltu vain muutamia dermatologiassa käytettyjä IHC-värjäyksiä.
| IHC-värjäys | Käyttökohteet/Kuvan kuvateksti |
|---|---|
| BCL2 | Käytetään tyvisolusyöpien ja trikoepiteelioomien erottamiseen toisistaan |
| CD3 | T-solumarkkeri; vahvasti positiivinen mycosis fungoidesissa |
| CD4 | Helper T-solumarkkeri |
| CD8 | Suppressori T-…solumarkkeri |
| CD20 | B-solumarkkeri |
| CD30 | Voidaan käyttää Hodgkinin lymfooman ja anaplastisten lymfoomien diagnostiikassa. Suuret solut: Golgin laitteiston ja kalvojen värjäytyminen |
| CD31 | Hyötyy endoteelikasvaimen tunnistamisessa |
| CD34 | Erottelee erilaisia endoteelikasvaimia ja on positiivinen dermatofibrosarkoomassa |
| CD56 | Käytetään diagnostiikassa, jossa ei-Hodgkinin lymfoomia, leukemiat ja pienisoluiset karsinoomat |
| CD117 | KIT-reseptorin merkkiaine ja positiivinen erilaisissa kasvaimissa, mukaan lukien mastosytoosi |
| CDKN2A (p16) | Kasvainsuppressorimerkkiaine, joka on positiivinen HPV:n yhteydessä esiintyvissä kasvaimissa, aktiiniset keratoosit ja levyepiteelikarsinooma |
| CK (erilaiset) | Sytokeratiinit voivat auttaa erottamaan hyvänlaatuiset ja pahanlaatuiset lisäkasvaimet toisistaan |
| CK 20 | Spesifinen Merkelin solusyövälle. Voi auttaa tunnistamaan ruoansulatuskanavan ja sukuelinten adenokarsinoomia sekä ruoansulatuskanavan epiteelikasvaimia |
| Sytokeratiini Korkea molekyylipaino | Käytetään duktaalikarsinoomien tunnistamiseen, levyepiteelikarsinoomat ja muut epiteelin kasvaimet |
| Desmin | Lihasmerkkiaine |
| EMA | Käytetään ekskriinisten kasvainten tunnistamiseen, Pagetin tauti ja talikarsinoomat |
| Faktori 13 | Voi auttaa lääkäreitä erottamaan dermatofibrosarkooman ja dermatofibrooma |
| HHV8 | Human herpesvirus 8 |
| HMB 45 | Käytetään melanosyyttien tunnistamiseen, erityisesti melanoomassa, mutta negatiivinen desmoplastisessa melanoomassa |
| Melano-a | Voi auttaa tunnistamaan melanosyyttiset naevussolut ja melanoomat |
| PDL1 | Programmed death-ligand 1 |
| S-100 | Käytetään merkitsemään melanosyyttikasvaimia, sekä naevi että melanooma |
| SMA | Sileän lihaksen antigeeni |
| SOX-10 | Melanosyyttisten kasvainten nukleaarinen merkkiaine |
| Treponema pallidum | Todistaa organismeja sekundaarisessa syfiliksessä |