Kemiallinen rakenne HEPES = N-(2-hydroksietyyli)
piperatsiini-N’-
(2-etaanisulfonihappo)
piperatsiini-N’-
(2-etaanisulfonihappo)
HEPES on yleinen puskurikemikaali, joka on samanlainen puskurikemikaali kuin tris Tris-HCl-puskureissa ja fosfaatit PBS:ssa. Puskureita käytetään pitämään pH tietyssä arvossa ja niillä voidaan ”puskuroida” pienten happo-/emäsmäärien lisäys.
HEPESin ominaisuus
Vakaa pH lämpötilan suhteen, ei primaarisia amiiniryhmiä, ei metallikelaatiota, lähellä fysiologista pH-aluetta. HEPESiä käytetään usein proteiinien liukoisuuden ylläpitämiseen biokemiallisissa kokeissa.
- pKa 25C:ssa 7,55 (7,31 37C:ssa); (2. pKa pH 3:ssa ei kiinnosta)
- käyttökelpoinen puskurialue 6.8-8,2
- molekyylipaino 238,3 g/mol
- ΔpKa/ΔT = -,014
- HEPES sisältää tertiäärisiä amiineja, jotka ovat reaktiivisia tietyissä olosuhteissa.
- Kemiallinen kaava: C8H18N2O4S; N-(2-hydroksietyyli)-piperatsiini-N’-(2-etaanisulfonihappo); eli 4-(2-hydroksietyyli)-1-piperatsiinietaanisulfonihappo; CAS-numero: 7365-45-9
Puskurit ovat tyypillisesti 1 M:n puskureita, jotka valmistetaan neutralisoimalla HEPES natriumhydroksidilla. HEPES on olennaisesti liukenematon, kunnes se neutraloidaan.
1M HEPES KOH-puskuri 7.5
- 700 ml ultrapuhdasta vettä
- 238.3 g HEPES
- KOH (kaliumhydroksidi) pellettejä pH:n säätämiseksi 7,5:een
- 1L w ultrapuhdasta vettä; steriloidaan suodattamalla
1M HEPES-NaOH pH 7.5
- 700 ml ultrapuhdasta vettä
- 238.3 g HEPES
- ~5.5 g NaOH (natriumhydroksidi) pellettejä pH:n säätämiseksi 7.5:een
- 1L w ultrapuhtaaseen veteen; steriloidaan suodattamalla
Linkit
- alkuperäisjulkaisut: Good’66 PMID 5942950, Good’74 PMID 4206745, Blanchard’84 PMID 6717292
- Wikipedia: puskuriliuos
- CP: yleiset puskurit
- Luettelo yleisistä puskureista Smith Collegesta
.