Kemiallinen rakenne HEPES = N-(2-hydroksietyyli)
piperatsiini-N’-
(2-etaanisulfonihappo)

HEPES on yleinen puskurikemikaali, joka on samanlainen puskurikemikaali kuin tris Tris-HCl-puskureissa ja fosfaatit PBS:ssa. Puskureita käytetään pitämään pH tietyssä arvossa ja niillä voidaan ”puskuroida” pienten happo-/emäsmäärien lisäys.

HEPESin ominaisuus

Vakaa pH lämpötilan suhteen, ei primaarisia amiiniryhmiä, ei metallikelaatiota, lähellä fysiologista pH-aluetta. HEPESiä käytetään usein proteiinien liukoisuuden ylläpitämiseen biokemiallisissa kokeissa.

  • pKa 25C:ssa 7,55 (7,31 37C:ssa); (2. pKa pH 3:ssa ei kiinnosta)
  • käyttökelpoinen puskurialue 6.8-8,2
  • molekyylipaino 238,3 g/mol
  • ΔpKa/ΔT = -,014
  • HEPES sisältää tertiäärisiä amiineja, jotka ovat reaktiivisia tietyissä olosuhteissa.
  • Kemiallinen kaava: C8H18N2O4S; N-(2-hydroksietyyli)-piperatsiini-N’-(2-etaanisulfonihappo); eli 4-(2-hydroksietyyli)-1-piperatsiinietaanisulfonihappo; CAS-numero: 7365-45-9

Puskurit ovat tyypillisesti 1 M:n puskureita, jotka valmistetaan neutralisoimalla HEPES natriumhydroksidilla. HEPES on olennaisesti liukenematon, kunnes se neutraloidaan.

1M HEPES KOH-puskuri 7.5

  • 700 ml ultrapuhdasta vettä
  • 238.3 g HEPES
  • KOH (kaliumhydroksidi) pellettejä pH:n säätämiseksi 7,5:een
  • 1L w ultrapuhdasta vettä; steriloidaan suodattamalla

1M HEPES-NaOH pH 7.5

  • 700 ml ultrapuhdasta vettä
  • 238.3 g HEPES
  • ~5.5 g NaOH (natriumhydroksidi) pellettejä pH:n säätämiseksi 7.5:een
  • 1L w ultrapuhtaaseen veteen; steriloidaan suodattamalla

Linkit

  • alkuperäisjulkaisut: Good’66 PMID 5942950, Good’74 PMID 4206745, Blanchard’84 PMID 6717292
  • Wikipedia: puskuriliuos
  • CP: yleiset puskurit
  • Luettelo yleisistä puskureista Smith Collegesta

.

Vastaa

Sähköpostiosoitettasi ei julkaista.