HEPES

Estructura química del HEPES = N-(2-hidroxietil)
piperazina-N’-
(ácido 2-etanosulfónico)

El HEPES es un producto químico amortiguador común similar al Tris en los tampones Tris-HCl y a los fosfatos en el PBS. Los tampones se utilizan para mantener el pH en un valor determinado y pueden «amortiguar» la adición de pequeñas cantidades de ácidos/bases.

Propiedades del HEPES

PH estable frente a la temperatura, sin grupos aminos primarios, sin quelación de metales, cerca del rango de pH fisiológico. El HEPES se utiliza a menudo para mantener la solubilidad de las proteínas en los experimentos bioquímicos.

• pKa a 25C de 7,55 (7,31 a 37C); (el 2º pKa a pH 3 no es de interés)
• rango de amortiguación utilizable de 6.8 a 8,2
• peso molecular 238,3 g/mol
• ΔpKa/ΔT = -.014
• HEPES contiene aminas terciarias, que son reactivas bajo ciertas condiciones.
• Fórmula química: C8H18N2O4S; ácido N-(2-hidroxietil)-piperazina-N’-(2-etanosulfónico); también conocido como ácido 4-(2-hidroxietil)-1-piperazinaetanosulfónico; número CAS: 7365-45-9

Los tampones suelen ser de 1 M, preparados mediante la neutralización del HEPES con hidróxido de sodio. El HEPES es esencialmente insoluble hasta que se neutraliza.

Tampón KOH HEPES 1M 7,5

• 700 ml de agua ultrapura
• 2383 g de pellets de HEPES
• KOH (hidróxido de potasio) para ajustar el pH a 7,5
• a 1L w de agua ultrapura; esterilizar por filtración

1M de HEPES-NaOH pH 7.5

• 700 ml de agua ultrapura
• 238,3 g de HEPES
• ~5,5 g de pellets de NaOH (hidróxido de sodio) para ajustar el pH a 7,5
• a 1L de agua ultrapura; esterilizar por filtración

Enlaces

• publicaciones originales: Good’66 PMID 5942950, Good’74 PMID 4206745, Blanchard’84 PMID 6717292
• Wikipedia: solución tampón
• CP: tampones comunes
• Lista de tampones comunes del Smith College

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