Explicación de lo que ocurre
Esto supone que has leído la explicación de lo que ocurre durante la cromatografía en capa fina. Si no lo has hecho, sigue el primer enlace en la parte superior de la página y vuelve a este punto después.
El compuesto azul es obviamente más polar que el amarillo – tal vez incluso tiene la capacidad de enlace de hidrógeno. Se puede saber esto porque el compuesto azul no viaja a través de la columna muy rápidamente. Eso significa que debe adsorberse más fuertemente al gel de sílice o a la alúmina que el amarillo. El amarillo, menos polar, pasa más tiempo en el disolvente y, por tanto, se lava a través de la columna mucho más rápido.
El proceso de lavado de un compuesto a través de una columna utilizando un disolvente se conoce como elución. El disolvente se conoce a veces como eluyente.
¿Qué pasa si también quieres recoger el compuesto azul?
¡Tardarás siglos en lavar el compuesto azul a la velocidad a la que viaja en este momento! Sin embargo, no hay ninguna razón por la que no puedas cambiar el disolvente durante la elución.
Supón que sustituyes el disolvente que has estado utilizando por un disolvente más polar una vez que se ha recogido todo el amarillo. Esto tendrá dos efectos, ambos acelerarán el paso del compuesto azul por la columna.
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El disolvente polar competirá por el espacio en el gel de sílice o la alúmina con el compuesto azul. Cualquier espacio ocupado temporalmente por las moléculas de disolvente en la superficie de la fase estacionaria no está disponible para que las moléculas de azul se adhieran y esto tenderá a mantenerlas en movimiento en el disolvente.
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Habrá una mayor atracción entre las moléculas de disolvente polar y las moléculas de azul polar. Esto tenderá a atraer a las moléculas azules que se adhieran a la fase estacionaria de vuelta a la solución.
El efecto neto es que con un disolvente más polar, el compuesto azul pasa más tiempo en solución y, por tanto, se mueve más rápido.
Entonces, ¿por qué no utilizar este disolvente alternativo en primer lugar? La respuesta es que si ambos compuestos de la mezcla se desplazan rápidamente a través de la columna desde el principio, probablemente no se obtendrá una separación tan buena.
¿Y si todo lo que hay en su mezcla es incoloro?
Si fuera a utilizar la cromatografía en columna para purificar el producto de una preparación orgánica, es bastante probable que el producto que desea sea incoloro aunque una o varias de las impurezas sean coloreadas. Supongamos en el peor de los casos que todo es incoloro.
¿Cómo se sabe cuándo la sustancia que se desea ha llegado al fondo de la columna?
¡No hay una manera rápida y fácil de hacerlo! Lo que se hace es recoger lo que sale del fondo de la columna en toda una serie de tubos etiquetados. El tamaño de cada muestra dependerá, obviamente, del tamaño de la columna: puede recoger muestras de 1 cm3 o de 5 cm3 o lo que sea apropiado.
A continuación, puede tomar una gota de cada solución y hacer un cromatograma de capa fina con ella. Colocarías la gota en la línea base junto a una gota de una muestra pura del compuesto que estás haciendo. Haciendo esto repetidamente, puede identificar cuáles de sus muestras recogidas en la parte inferior de la columna contienen el producto deseado, y sólo el producto deseado.
Una vez que sepa esto, puede combinar todas las muestras que contienen su producto puro, y luego eliminar el disolvente. (La forma de separar el disolvente del producto no es directamente relevante para este tema y variaría dependiendo de su naturaleza exacta – por lo que ni siquiera voy a intentar una generalización.)