Klinické informace
CD20 je protein, který je exprimován na povrchu B buněk, počínaje pre-B buňkami a také na zralých B buňkách v kostní dřeni a na periferii. CD20 není exprimován nahematopoetických kmenových buňkách, pro-B buňkách ani na normálních plazmatických buňkách.1)Plazmablasty a stimulované plazmatické buňky mohou exprimovat CD20.2) CD20 je na B buňkách obvykle exprimován společně s CD19, dalším markerem diferenciace B buněk. Zdá se, že CD20 hraje roli ve vývoji B-buněk, diferenciaci, signalizaci B-buněčného receptoru (BCR) a iniciačních událostech buněčného cyklu (3) CD20 se nevylučuje z povrchu B-buněk a neinternalizuje se při vazbě s protilátkou anti-CD20, ani není obvykle přítomen jako rozpustný volný antigen v cirkulaci.(3) Některé primární humorální imunodeficience, jako je agamaglobulinemie vázaná na X a autozomálně recesivníagamaglobulinemie, jsou charakterizovány úplnou absencí nebo výrazným snížením periferních B-buněk, které exprimují jak CD20, takCD19 (další marker diferenciace B-buněk).
Bylo prokázáno, že mutace v genu CD19 jsou spojeny s primárním humorálním imunodeficitem, někdy klasifikovaným jako běžný variabilní imunodeficit (CVID).4) Tento defekt představuje méně než 1 % až 2 % pacientů s CVID a zřejmě se dědí jako autozomálněrecesivní defekt.(4) Vzhledem k tomu, že tito pacienti mají normální počet B-buněk s chybějící expresí CD19 na povrchu buněk (4), lze CD20 použít jako marker, který pomůže tyto pacienty identifikovat.
Opačná situace nastává u pacientů, kteří dostávají rituximab, ofatumumab a další anti-CD20 monoklonální protilátky, které se používají k léčbě některých druhů rakoviny, autoimunitních onemocnění nebo k depleci B-buněk, aby se zabránilo humorální rejekci při pozitivní křížové transplantaci ledvin. Tyto látky blokují dostupná vazebná místa CD20, a proto protilátka použitá pro tento průtokový cytometrický test nemůže rozpoznat molekulu CD20 na B buňkách. Současné použití markeru CD19 poskytuje informace o rozsahu vyčerpání B-buněk při použití této konkrétní léčebné strategie.
Je známo, že absolutní počty lymfocytárních podskupin jsou ovlivňovány řadou biologických faktorů, včetně hormonů, prostředí a teploty. Studie denních(cirkadiánních) změn počtu lymfocytů prokázalyprogresivní nárůst počtu CD4 T-buněk v průběhu dne, zatímcoCD8 T-buněk a CD19+ B-buněk se zvyšuje mezi 8:30 a polednem,přičemž mezi polednem a odpolednem nedochází k žádným změnám. Počty přirozených zabíječských buněk jsou naproti tomu po celý den konstantní.(5)Bylo prokázáno, že cirkadiánní změny v počtu cirkulujících T-buněk negativně korelují s plazmatickou koncentrací kortizolu.(6-8) Kortizol a koncentrace katecholaminů totiž řídí distribuci, a tedy i počtynaivních a efektorových CD4 a CD8 T-buněk.(6) Obecně se uznává, že nižší počty CD4 T-buněk jsou pozorovány ráno ve srovnání s večerem (9) a v létě ve srovnání se zimou (10) Tyto údaje tedy naznačují, že načasování a konzistence v době odběru krve je při sériovém monitorování pacientů na podskupiny lymfocytů kritická.
.