Chemická struktura HEPES = N-(2-hydroxyethyl)
piperazin-N‘-
(kyselina 2-etansulfonová)

HEPES je běžná pufrovací chemikálie podobně jako Tris v pufrech Tris-HCl a fosforečnany v PBS. Pufry se používají k udržení pH na určité hodnotě a mohou „pufrovat“ přídavek malých množství kyselin/základů.

Vlastnost HEPES

Stabilní pH v závislosti na teplotě, bez primárních aminoskupin, bez chelatace kovů, téměř fyziologický rozsah pH. HEPES se často používá k udržení rozpustnosti bílkovin při biochemických experimentech.

  • pKa při 25C 7,55 (7,31 při 37C); (2. pKa při pH 3 není předmětem zájmu)
  • použitelný pufrovací rozsah 6. pH.8 až 8,2
  • molekulová hmotnost 238,3 g/mol
  • ΔpKa/ΔT = -,014
  • HEPES obsahuje terciární aminy, které jsou za určitých podmínek reaktivní.
  • Chemický vzorec: C8H18N2O4S; N-(2-hydroxyethyl)-piperazin-N‘-(2-etansulfonová kyselina); také známá jako 4-(2-hydroxyethyl)-1-piperazinetansulfonová kyselina; číslo CAS: 7365-45-9

Pufry jsou obvykle 1 M, připravené neutralizací HEPES hydroxidem sodným. HEPES je v podstatě nerozpustný, dokud není neutralizován.

1M HEPES KOH pufr 7,5

  • 700 ml ultračisté vody
  • 238.3 g pelet HEPES
  • KOH (hydroxid draselný) pro úpravu pH na 7,5
  • do 1 l w ultračisté vody; sterilizovat filtrací

1M HEPES-NaOH pH 7.5

  • 700 ml ultračisté vody
  • 238,3 g HEPES
  • ~5,5 g pelet NaOH (hydroxid sodný) pro úpravu pH na 7,5
  • na 1L w ultračisté vody; sterilizovat filtrací

Odkazy

  • původní publikace: Good’66 PMID 5942950, Good’74 PMID 4206745, Blanchard’84 PMID 6717292
  • Wikipedia: pufrovací roztok
  • CP: běžné pufry
  • Seznam běžných pufrů ze Smith College

.

Napsat komentář

Vaše e-mailová adresa nebude zveřejněna.