Vitamin B12 je tmavě červená krystalická hygroskopická látka, volně rozpustná ve vodě a alkoholu, ale nerozpustná v acetonu, chloroformu a éteru. Kyanokobalamin má molekulovou hmotnost 1 355 a má nejsložitější strukturu a je nejtěžší sloučeninou ze všech vitaminů. Oxidační a redukční činidla a vystavení slunečnímu záření mají tendenci ničit jeho aktivitu. Ztráty vitaminu B12 při zpracování krmiva nejsou obvykle nadměrné, protože vitamin B12 je stabilní při teplotách až 250 °C. Z celkového množství vitaminu B12 produkovaného bachorovými mikroorganismy se vstřebává pouze 1 až 3 %. Stejně jako u většiny živočišných druhů je místem absorpce u přežvýkavců spodní část tenkého střeva. Značné množství vitaminu B12 je vylučováno do dvanáctníku a následně reabsorbováno v ileu.
Průchod vitaminu B12 střevní stěnou je složitý a vyžaduje zásah určitých nosičů schopných vázat molekulu vitaminu (McDowell, 2000). Pro vstřebávání vitaminu B12 u většiny studovaných druhů je zapotřebí následující: (a) dostatečné množství vitaminu B12 nebo kobaltu v potravě; b) funkční abomasum (pravý žaludek) pro rozklad bílkovin potravy pro uvolnění vitaminu B12; c) funkční abomasum pro produkci intrinsického faktoru pro absorpci vitaminu B12 přes ileum; d) funkční pankreas (sekrece trypsinu) potřebný pro uvolnění vázaného vitaminu B12 před spojením vitaminu s intrinsickým faktorem; a e) funkční ileum s receptorem a absorpčními místy. Defekty žaludeční šťávy jsou zodpovědné za většinu případů malabsorpce vitaminu B12 z potravy u monogastrických zvířat (Carmel, 1994), ale u přežvýkavců je hlavním problémem nedostatek kobaltu pro syntézu vitaminu B12 (McDowell, 1997).
Nízká hladina vitaminu B12 v krvi (hypokobalamanie) u koček byla často ztotožněna s onemocněním trávicího traktu (včetně jater a slinivky břišní) (Ruaux et al..), 2001; 2005; 2009; Simpson et al., 2001; Reed et al., 2007). Mezi faktory, které snižují vstřebávání vitaminu B12, patří nedostatek bílkovin, železa a vitaminu B6, odstranění štítné žlázy a kyselina tříslová v potravě (Hoffmann-La Roche, 1984). Vstřebávání vitaminu B12 je omezeno počtem vazebných míst pro vnitřní faktor a vitamin B12 v ileální sliznici, takže z jedné perorální dávky vitaminu se u člověka nevstřebá více než asi 1 až 1,5 µg (Bender, 1992). Absorpce je také pomalá; maximální koncentrace vitaminu v krvi je dosaženo až po 6 až 8 hodinách po perorální dávce.
Koncentráty vnitřního faktoru připravené ze žaludku jednoho živočišného druhu nezvyšují ve všech případech absorpci B12 u jiných živočišných druhů nebo u lidí. Mezi jednotlivými živočišnými druhy existují strukturální rozdíly ve vnitřních faktorech vitaminu B12. Podobně existují druhové rozdíly u transportních proteinů vitaminu B12 (Polak et al., 1979). Intrinsický faktor byl prokázán u člověka, opice, prasete, potkana, krávy, fretky, králíka, křečka, lišky, lva, tygra a leoparda. V současné době nebyl zjištěn u morčete, koně, ovce, kuřete a různých dalších druhů. V současné době je zjištěno, že psí žaludek produkuje pouze malé množství vnitřního faktoru, přičemž větší množství produkuje slinivka břišní (Batt et al., 1991).
Skladování vitaminu B12 se nachází hlavně v játrech. Dalšími zásobními místy jsou ledviny, srdce, slezina a mozek. andrews et al (1960) uvedli, že podíl kobaltu v játrech, který se vyskytuje jako vitamin B12, se liší podle stavu kobaltu u zvířat. Za pastevních podmínek s dostatečným obsahem kobaltu v pastvě může být většina jaterního kobaltu tvořena vitaminem B12, ale při nedostatku kobaltu je v této formě přítomna pouze asi třetina jaterního kobaltu. To naznačuje, že při nedostatku kobaltu se jaterní vitamin B12 vyčerpává rychleji než jiné formy kobaltu.
Přestože je vitamin B12 rozpustný ve vodě, Kominato (1971) uvádí tkáňový poločas 32 dní, což ukazuje na značné tkáňové zásoby. Skot a ovce s normálními zásobami v játrech mohou přijímat stravu s nedostatkem kobaltu po celé měsíce, aniž by se projevily příznaky nedostatku vitaminu B12.
U přežvýkavců se kobalt i vitamin B12 vylučují převážně výkaly, ačkoli různá množství se vylučují močí (Smith a Marston, 1970). Kojící krávy na normální stravě vylučují 86 až 87,5 % veškerého vyloučeného kobaltu výkaly (hlavně se žlučí), 0,9 až 1,0 % močí a 11,5 až 12,5 % mlékem.
Funkce
Vitamín B12 je nezbytnou součástí několika enzymových systémů, které vykonávají řadu základních metabolických funkcí. Většina reakcí zahrnuje přenos nebo syntézu jednouhlíkatých jednotek, např. methylových skupin. Vitamin B12 je metabolicky příbuzný s dalšími základními živinami, jako je cholin, methionin a kyselina listová. (Savage a Lindenbaum, 1995; Stabler, 2006). Ačkoli se nejdůležitější úkoly vitaminu B12 týkají metabolismu nukleových kyselin a bílkovin, funguje také v metabolismu tuků a sacharidů. Souhrn funkcí vitaminu B12 zahrnuje: (a) syntézu purinů a pyrimidinů; (b) přenos methylových skupin; (c) tvorbu bílkovin z aminokyselin; a (d) metabolismus sacharidů a tuků. Obecné funkce vitaminu B12 spočívají v podpoře syntézy červených krvinek a v udržování integrity nervového systému, což jsou funkce výrazně ovlivněné při nedostatku. Celková syntéza bílkovin je u zvířat s nedostatkem vitaminu B12 narušena (Friesecke, 1980; McDowell, 2000). Glukoneogeneze a hemopoéza jsou kriticky ovlivněny nedostatkem kobaltu a metabolismus sacharidů, lipidů a nukleových kyselin je závislý na adekvátním metabolismu B12a kyseliny listové. Další funkce vitaminu B12 se týká imunitních funkcí. U myší bylo zjištěno, že nedostatek vitaminu B12 ovlivňuje produkci imunoglobulinů a hladiny cytokinů (Funada et al., 2001). vitamin B12 je nezbytný při redukci jedouhlíkových sloučenin mravenčanu a formaldehydu, a tím se spolu s kyselinou listovou podílí na biosyntéze labilních methylových skupin. Tvorba labilních methylových skupin je nezbytná pro biosyntézu purinových a pyrimidinových bází, které představují základní složky nukleových kyselin. U lidí zásah do metabolismu jednoho uhlíku zvyšuje riziko kolorektálního karcinomu, protože metabolismus jednoho uhlíku má kritické funkce v biologických metylačních reakcích při syntéze a opravě DNA. Ve studiích s potkany vytvořila dieta s nedostatkem vitaminu B12, která nebyla dostatečně závažná, aby způsobila anémii nebo onemocnění, aberace v substituci bází i v metylaci DNA tlustého střeva, což může zvýšit náchylnost ke karcinogenezi (Choi et al., 2004).
Defekce vitaminu B12 vyvolá nedostatek kyseliny listové tím, že blokuje využití derivátů kyseliny listové. Enzym obsahující vitamin B12 odstraňuje methylovou skupinu z methylfolátu, čímž regeneruje tetrahydrofolát (THF), který se používá při výrobě 5,20-methylen THF potřebného pro syntézu thymidylátu.
V metabolismu zvířat se propionát potravního nebo metabolického původu přeměňuje na sukcinát, který pak vstupuje do cyklu kyseliny trikarboxylové (Krebsova cyklu). Methylmalonyl-CoA isomeráza (mutáza) je enzym vyžadující vitamin B12 (5´-deoxyadenosylkobalamin), který katalyzuje přeměnu methylmalonyl-CoA na sukcinyl-CoA. Flavin a Ochoa (1957) stanovili, že na produkci sukcinátu se podílejí následující kroky:
Propionát + ATP + CoA → propionyl-CoAPropionyl-CoA + CO2 + ATP → methylmalonyl-CoA (a)
Methylmalonyl-CoA (a) → methylmalonyl-CoA (b)
Methylmalonyl-CoA (b) → sukcinyl-CoA
Methylmalonyl-CoA (a) je neaktivní izomer. Jeho aktivní forma, (b), se přeměňuje na sukcinyl-CoA pomocí methylmalonyl-CoA izomerázy (methylmalonyl-CoA mutázy) (čtvrtá reakce). Vitamin B12 je pro studované živočišné druhy metabolickou esencí a nedostatek vitaminu B12 lze vyvolat přídavkem vysokého množství kyseliny propionové v potravě. Metabolismus kyseliny propionové je však zvláště zajímavý ve výživě přežvýkavců, protože velké množství vzniká při fermentaci sacharidů v bachoru. Produkce propionátu probíhá normálně, ale při nedostatku kobaltu nebo vitaminu B12 je snížena rychlost jeho clearance z krve a dochází k hromadění methylmalonyl-CoA. To má za následek zvýšené vylučování kyseliny methylmalonové močí a také ztrátu chuti k jídlu, protože zhoršený metabolismus propionátu vede k vyšší hladině propionátu v krvi, která je nepřímo úměrná dobrovolnému příjmu krmiva (MacPherson, 1982).
Potřeby
Původem vitaminu B12 v přírodě je zřejmě mikrobiální syntéza. Je syntetizován mnoha bakteriemi, ale zřejmě ne kvasinkami nebo většinou hub. Existuje jen málo důkazů, že tento vitamin je produkován v tkáních vyšších rostlin nebo živočichů. Několik zpráv naznačuje omezenou syntézu B12 několika rostlinami, ale v zanedbatelném množství vzhledem k potřebám zvířat. Syntéza tohoto vitaminu v trávicím traktu má pro zvířata značný význam (McDowell, 2000). U některých druhů (např. drůbeže) by však střevní syntéza byla nevýznamná vzhledem ke krátkému střevnímu traktu a rychlému pohybu krmiva gastrointestinálním traktem. Potřeba vitaminu B12 je mimořádně malá. Přiměřená dávka je pouze několik µg na kg krmiva. Potřeba vitaminu B12 u různých druhů závisí na množství několika dalších živin v krmivu. Nadbytek bílkovin zvyšuje potřebu vitaminu B12 stejně jako úroveň užitkovosti. Zdá se, že potřeba vitaminu B12 závisí na množství cholinu, methioninu a kyseliny listové v krmivu; vitamin B12 je také propojen s metabolismem kyseliny askorbové (Scott et al., 1982). Potřeba vitaminu B12 i kyseliny listové se snižuje, pokud strava obsahuje hojnost sloučenin, které mohou dodávat methylové skupiny (Dyer et al., 1949). Sewell et al. (1952) prokázali, že vitamin B12 má šetrný vliv na potřebu methioninu u prasat. Ve výživě kuřat existuje vzájemný vztah mezi vitaminem B12 a kyselinou pantotenovou, přičemž kyselina pantotenová má šetřící účinek na potřebu vitaminu B12. Potřebu mohou ovlivnit také složky stravy, protože bylo prokázáno, že pšeničné otruby snižují dostupnost vitaminu B12 u lidí (Lewis et al., 1986).
Potřeba stravy závisí na střevní syntéze a tkáňových rezervách při narození. Střevní syntéza pravděpodobně vysvětluje časté selhání při vzniku nedostatku vitaminu B12 u prasat a potkanů na dietách sestavených tak, aby neobsahovaly vitamin B12. Nedostatek však může snadno vzniknout u potkanů, pokud je koprofagii zcela zabráněno (Barnes a Fiala, 1958). Sklon psa ke koprofágii zajistí část potřeby vitaminu B12. Psi i kočky pravděpodobně získávají část vitaminu B12 také přímým vstřebáváním vitaminu, který vzniká bakteriální syntézou ve střevě. Množství z tohoto zdroje však není spolehlivé. Některé střevní mikroorganismy údajně mohou konkurovat vnitřnímu faktoru pro vitamin B12, a tím bránit vstřebávání vitaminu v dostatečném množství (Giannella et al., 1971; 1972). U psů mohou potřebu vitaminu B12 zvyšovat také infekce měchovci (Corbin a Kronfeld, 1972).
Bylo prokázáno, že genetické faktory zvyšují potřebu vitaminu B12 u psů i koček. Diagnóza dědičné selektivní malabsorpce vitaminu B12 u psů byla zaznamenána u border kolií, obřích kníračů, australských ovčáků, bíglů a čínských šarpejek (Fordyce et al., 2000; Battersby et al., 2005; Grϋtzner et al.,2010). Grϋtzner et al. (2010) poznamenali, že oblast chromozomu 13 by měla být zmapována a podrobně prozkoumána z hlediska možných mutací spojených s tímto onemocněním u shar peis. Fyfe et al. (1989; 1991a) popsali rodinu psů s klinickými, genetickými a laboratorními znaky selektivní střevní malabsorpce vitaminu B12, která je pozorována u lidí. Malabsorpce byla způsobena neúčinnou kartáčovou expresí receptoru pro intrinsický faktor a vitamin B12 v důsledku mutace tohoto komplexu a jeho retence (Fyfe et al., 1991b). U koček byl prokázán nedostatek vitaminu B12 spojený s methylmalonovou acidémií (Vaden et al., 1992). Tento defekt ve vstřebávání vitaminu B12 je zřejmě důsledkem vrozené chyby metabolismu.
Výzkum ukázal, že psi a kočky vitamin B12 potřebují, ale kvantitativní potřeba nebyla podrobně stanovena. Uvedené požadavky vycházejí z některých výzkumů provedených u psů a koček a z údajů od jiných zvířat.
A. Požadavky pro psy
Protože nedostatek vitaminu B12 není u psů běžný, není zatím známa žádná minimální hodnota potřeby, ale NRC (2006) navrhuje doporučenou potřebu vitaminu B12jako 35 µg na kg (15,9 µg na libru) stravy pro všechny třídy psů. Přesné doporučení dodatečných požadavků během březosti a laktace je obtížnější. Potřeba u fen krmených dietami na bázi sójových bílkovin může být během březosti vyšší než výše uvedené doporučení, protože Woodward a Newberne (1966) zaznamenali hydrocefalii u mláďat potkaních samic krmených dietou na bázi sóji. Tomuto stavu se podařilo zabránit podáváním 50 µg vitaminu B12 na kg (22,7 µg na libru) krmiva. Na základě krmiva doporučuje Asociace amerických úředníků pro kontrolu krmiv (AAFCO, 2007) 22 µg vitaminu B12 na kg (10 µg na libru) pro všechny třídy psů
B. Požadavky pro kočky
Teeter et al. (1977) zjistili, že pro dobrý zdravotní stav koček postačuje podávání čištěné stravy s obsahem 20 µg vitaminu B12 na kg (9,1 µg na libru) suché stravy. Dieta pro kočky obsahující 20 µg vitaminu B12 na kg (9,1 µg na libru) podporovala březost, laktaci, růst koťat a normální hladinu hemoglobinu. Podle NRC (2006) je odhadovaná potřeba vitaminu B12 pro všechny třídy koček 22,5 µg na kg (10,2 µg na libru) krmiva. Na základě krmiva doporučuje AAFCO (2007) pro všechny třídy koček 20 µg vitaminu B12 na kg (9,1 µg na libru).
Zdroje
Přiměřeně dobrým zdrojem vitaminu B12 jsou krmiva živočišného původu – maso, játra, ledviny, mléko, vejce a ryby. Ledviny a játra jsou vynikajícími zdroji a tyto orgány jsou bohatší na vitamin B12 z přežvýkavců než z většiny nepřežvýkavců. Přítomnost vitaminu B12 v živočišných tkáních je způsobena příjmem vitaminu B12 v krmivech nebo střevní či bachorovou syntézou. Mezi nejbohatší zdroje patří fermentační zbytky, aktivovaný čistírenský kal a hnůj. Mikrobiální syntéza tohoto vitaminu v trávicím traktu má pro zvířata značný význam. Typická komerčně připravovaná krmiva pro psy a kočky, která obsahují maso, mléko, ryby nebo jiné živočišné produkty, by měla obsahovat dostatečné množství vitaminu B12. Také většina komerčních krmiv pro domácí zvířata je doplněna stabilním B12 (Hand et al., 2010).
Důkazy naznačují, že množství a druhy objemných krmiv ovlivňují syntézu vitaminu B12 v bachoru, a to i v případě, že je dodáván dostatečný kobalt. Omezení příjmu objemných krmiv údajně zvýšilo hladinu bachorové tekutiny, zvýšilo hladinu v séru, snížilo hladinu vitaminu B12 v mléce a játrech a zvýšilo vylučování tohoto vitaminu močí u krav ve srovnání s kravami krmenými objemnými krmivy ad libitum (Walker a Elliot, 1972). Hladiny vitaminu B12 v bachoru u dojnic krmených kukuřičnou siláží byly 1,4 až 2,7krát vyšší než u dojnic krmených sekaným nebo peletovaným senem (Dryden a Hartman, 1970).
Rostlinné produkty jsou prakticky bez B12. Vitamin B12 uváděný u vyšších rostlin v malém množství může být výsledkem syntézy půdními mikroorganismy, vylučování vitaminu do půdy s následnou absorpcí rostlinou. Kořenové hlízy některých luštěnin obsahují malé množství vitaminu B12. Bylo zjištěno, že některé druhy mořských řas obsahují znatelné množství vitaminu B12 (až 1 µg na gram nebo 0,45 µg na libru sušiny). Mořské řasy nesyntetizují vitamin B12. Je syntetizován bakteriemi spojenými s mořskými řasami a poté je v řasách koncentrován (Scott et al., 1982). Dagnelie et al (1991) uvádí, že vitamin B12 z řas je z velké části nedostupný. Poskytování řas dětem s nedostatkem B12 bylo ve srovnání s B12z rybích zdrojů neúčinné při zvyšování krevních parametrů. Bylo zjištěno, že vitamin B12 je dostupnější v pasterizovaném mléce (1,91 pmol na ml) než v syrovém mléce (1,54 pmol na ml), sterilizovaném mléce (1,25 pmol na ml) a sušeném mléce (1,27 pmol na ml), což naznačuje, že tepelná úprava pravděpodobně ovlivňuje biologickou dostupnost (Fie et al., 1994). Komerční zdroje vitaminu B12 se vyrábějí z fermentačních produktů a jsou dostupné jako kyanokobalamin. O biologické dostupnosti orálně přijímaného B12 v potravinách a krmivech je známo jen málo.
Pro zásobování přežvýkavců vitaminem B12 jsou důležité dietní zdroje kobaltu. Přestože většina krmiv má dostatečný obsah kobaltu, je tento prvek v krmivech pro pasoucí se přežvýkavce v mnoha částech světa nedostatkový (McDowell, 1997, 2000). Koncentrace kobaltu v plodinách a krmivech závisí na půdních faktorech, druhu rostlin, stupni zralosti, výnosu, způsobu obhospodařování pastvin, klimatu a pH půdy. Půda obsahující méně než 2 mg kobaltu na kg (0,9 mg na libru) je obecně považována za nedostatečnou pro přežvýkavce (Corrêa, 1957). Zvýšení pH vápněním snižuje příjem kobaltu rostlinami a může zvýšit závažnost nedostatku. Rostliny pěstované na půdě s 15 ppm kobaltu, která je neutrální nebo mírně kyselá, mohou obsahovat více kobaltu než rostliny pěstované na zásadité půdě s 40 ppm kobaltu (Latteur, 1962). Vysoké srážky mají tendenci vymývat kobalt z vrchní vrstvy půdy. Tento problém často zhoršuje rychlý růst pícnin během období dešťů, který obsah kobaltu ředí. Rostliny mají různý stupeň afinity ke kobaltu, některé jsou schopny tento prvek koncentrovat mnohem více než jiné. Například luštěniny mají obecně větší schopnost koncentrovat kobalt než trávy (Underwood, 1977). Kobalt potřebují bakterie vázající dusík v kořenových hlízkách luštěnin.
Defekce
Obecnými příznaky nedostatku vitaminu B12 u většiny druhů zvířat jsou ztráta chuti k jídlu, proměnlivý příjem krmiva a dramatický útlum růstu. Kromě toho se někdy objevuje drsná kůže a srst, zvracení a průjem, selhání hlasu a mírná anémie (Catron et al., 1952). Klinické případy u psů a koček, u nichž byl prokázán pouze nedostatek vitaminu B12, jsou omezené. Megaloblastická anémie a neurologické příznaky pozorované při nedostatku vitaminu B12 u perniciózní anémie u lidí nebyly u většiny ostatních zvířat, včetně psů a koček, pozorovány.Pozitivní diagnóza nedostatku vitaminu B12 se obvykle stanoví na základě nálezu subnormální koncentrace B12 v séru a tkáních. Nízké sérové hladiny jsou spojeny s nízkým obsahem vitaminu v těle. Kromě vitaminu B12 v séru jsou při diagnostice nedostatku vitaminu B12 velmi citlivé a specifické zvýšené hodnoty kyseliny methylmalonové a celkového homocysteinu, které lze použít k odlišení nedostatku vitaminu B12 od nedostatku kyseliny listové (Stabler et al., 1996). Sérové koncentrace vitaminu B12 byly stanoveny u psů (Caprelli et al., 1994; Davenport et al., 1994) a koček (Dunn et al., 1984) k posouzení stavu tohoto vitaminu. Nedostatek vitaminu B12 byl potvrzen zvýšenou hladinou kyseliny methylmalonové v moči u psů (Williams et al., 1969; Chanarin et al., 1973) a koček (Vaden et al., 1992). Klinickým testem na nedostatek vitaminu B12 u psů je zatížení zvířete prekurzorem kyseliny methylmalonové (např. valinem) a měření vylučování kyseliny methylmalonové močí (Williams et al., 1969; Chanarin et al., 1973).
A. Nedostatek u psů
Normálně psi nevykazují žádné příznaky nedostatku vitaminu B12, přesto mají určitě potřebu tohoto vitaminu, protože klinické příznaky se objevují u psů s určitými chorobnými stavy a při krmení zvířat nízkou koncentrací tohoto vitaminu v potravě (Ralston Purina, 1987). Existuje řada klinických zpráv o nedostatku vitaminu B12 u psů. Tyto zprávy se týkají buď nedostatku vyvolaného bakteriálním přerůstáním střeva, které má za následek sníženou dostupnost kobalaminu pro psa, nebo genetických abnormalit metabolismu vitaminu B12 (Hand et al., 2010). lavrová (1969) zjistila, že psi s vnitřními biliárními píštělemi měli malabsorpci vitaminu B12 a makrocytární anémii, stejně jako abnormality kostní dřeně. Anémie byla obecně makrocytárně hypochromní, makrocytárně normochromní, normocytárně hypochromní nebo normocytárně normochromní. Erytropoetická centra v kostní dřeni byla hypoplastická. Arnrich et al (1952) pozorovali, že štěňata kokršpanělů krmená 20 týdnů 20% dietou s purifikovaným kaseinem rostla lépe, když jim bylo do diety přidáno 50 µg vitaminu B12 na kg (22,7 µg na libru), přestože neměla žádné známky anémie. Campbell a Phillips (1953) zaznamenali zhoršenou reprodukci a také zjistili, že štěňata rostla lépe, když jim dieta poskytovala 22 µg na kg (10 µg na libru) vitaminu B12. u psů byla zaznamenána dědičná porucha střevní malabsorpce vitaminu B12 jako důsledek defektní kartáčové exprese receptoru pro vnitřní faktor – vitamin B12 (Fyfe et al., 1989; 1991b). U psů s nedostatkem vitaminu B12 se ve věku 12 týdnů objevila chronická nechutenství, letargie, chronická neregenerativní anémie a neprospívání. Nedostatek vitaminu B12 byl zjištěn u 50 % německých ovčáků s degenerativní myelopatií; klinické příznaky však nereagovaly na léčbu vitaminem B12 (Toennessen a Morin, 1995).
B. Deficit u koček
Kočky s nedostatkem vitaminu B12 vykazovaly špatný růst, letargii, vyhublost a vysokou hladinu vylučování kyseliny methylmalonové (Keesling a Morris, 1975; Vaden et al., 1992). Morris (1977) uvedl, že koťata, kterým byla podávána strava s nedostatkem vitaminu B12, rostla normálně po dobu tří až čtyř měsíců, poté se růst zastavil. Následně docházelo ke stále rychlejšímu úbytku tělesné hmotnosti, dokud nebyla zahájena suplementace parenterálním vitaminem B12, která přírůstky hmotnosti obnovila.
Úvahy o výživě
Vitamin B12 se vyrábí fermentací a je komerčně dostupný jako kyanokobalamin pro přidávání do krmiva. Vitamin B12 je jen mírně citlivý na teplo, kyslík, vlhkost a světlo (Gadient, 1986). Verbeeck (1975) uvádí, že vitamin B12 má dobrou stabilitu v premixech s minerálními látkami nebo bez nich, bez ohledu na zdroj minerálních látek. Yamada et al. (2008) však zaznamenali degradaci doplňkového vitaminu B12. Vitamin byl ovlivněn dobou skladování, působením světla, teplotou a vitaminem C. Bylo zjištěno, že část vitaminu B12 mohla být přeměněna na analogy vitaminu B12. Scott (1966) uvedl, že peletování má zřejmě malý vliv na obsah vitaminu B12 v krmivu.
Výsledky velkého počtu pokusů na zvířatech jsou přibližně rovnoměrně rozděleny mezi ty, které uvádějí pozitivní reakci na doplněk kyanokobalaminu ve stravě, a ty, které uvádějí malou nebo žádnou reakci. Rozdílné reakce mohou být způsobeny několika faktory: počátečními tělesnými zásobami, environmentálními zdroji vitaminu (jako jsou plísně, půda a zvířecí exkrementy), mikrobiální syntézou ve střevním traktu a přiměřeností nebo nedostatkem jiných živin, které ovlivňují požadavky na B12.
Používání komerčně dostupných krmiv pro psy a kočky by za normálních okolností poskytlo dostatečné množství dietního vitaminu B12 k uspokojení jejich požadavků. Kočky by měly přijímat dostatečné množství vitaminu B12 prostřednictvím rybích produktů, které jsou na tento vitamin bohaté. Psi praktikující koprofágii by měli dostávat bohatý zdroj vitaminu. Speciální suplementace vitaminu B12 by byla nutná u psů a koček, u kterých je podezření na genetické defekty v metabolismu tohoto vitaminu nebo je o nich známo. Nedostatečnost slinivky břišní by byla důvodem k doplňování vitaminu B12, protože je důležitou příčinou jeho vstřebávání u psů. Slinivka břišní je u tohoto druhu hlavním zdrojem vnitřního faktoru. Psi v těžkém tréninku potřebují dostatečné množství vitaminu B12, aby usnadnili vývoj erytrocytů a následně zvýšili schopnost krve přenášet kyslík. Některým saňovým psům byl údajně několik dní před závody podáván vitamin B12, aby se zvýšila plazmatická hladina erytrocytů (Corbin a Kronfeld, 1972).
Bezpečnost vitaminu
Přidávání vitaminu B12 do krmiva v množství, které značně převyšuje potřebu nebo vstřebatelnost, se zdá být bez nebezpečí. Jako bezpečné se pro myši navrhuje množství v potravě, které nejméně několikasetnásobně převyšuje potřebu (NRC, 1987). Nejsou k dispozici žádné údaje týkající se bezpečnosti vitaminu B12 u koček.Ačkoli u psa nebyla popsána přímá toxicita vitaminu B12, v jedné zprávě Pshonik a Gribanov (1961) zaznamenali poruchy reflexní aktivity ve formě zmenšení velikosti cévních podmíněných reflexů a zveličení nepodmíněných reflexů, když byl vitamin B12 podáván subkutánně v dávkách 2 až 33 µg na kg (0,91 až 15 µg na libru) tělesné hmotnosti.
.