Bloodborne Agents
Mycoplasma haemofelis (Mhf), “Candidatus Mycoplasma haemominutum” (Mhm), e “Candidatus M. turicensis” (Mtc), todos podem ser encontrados em gatos. Em gatos infectados experimentalmente, o Mhf é aparentemente mais patogênico do que o Mhm. Parece que o Mtc tem uma patogenicidade intermediária. O diagnóstico é baseado na demonstração do organismo na superfície dos eritrócitos no exame de uma fina película de sangue ou ensaio de PCR. O número de organismos flutua e, portanto, o exame da película de sangue pode ser falsamente negativo até 50% do tempo. O organismo pode ser difícil de encontrar citologicamente, particularmente na fase crônica. Assim, os ensaios de PCR são os testes de escolha devido à sensibilidade.13 Estão disponíveis iniciadores que podem amplificar os três hemoplasmas. Os ensaios de PCR em tempo real podem ser usados para monitorar o número de cópias durante e após o tratamento mas não têm maior sensibilidade, especificidade ou valor preditivo do que os ensaios de PCR convencionais.32 Os ensaios de PCR devem ser considerados na avaliação de gatos com febre inexplicável ou anemia que são citologicamente negativos. Além disso, o American College of Veterinary Internal Medicine (ACVIM) recomenda o rastreamento de gatos para uso como doadores de sangue através de ensaios de PCR para hemoplasmas.35 Muitos gatos (aproximadamente 15%) são portadores do relativamente não patogênico Candidatus M. haemominutum, e assim, resultados positivos nos testes podem nem sempre estar correlacionados com a presença de doença (PPV pobre).
Gatos podem ser infectados por E. canis-like organism2 e Anaplasma phagocytophilum.15 Pouco se sabe sobre os outros agentes desses gêneros em relação aos gatos. Como os organismos estão em gêneros diferentes, a reatividade cruzada sorológica é variável. Assim, embora as síndromes clínicas possam ser semelhantes, não há nenhum teste sorológico para documentar a infecção, e atualmente não há uma sorologia padronizada para gatos. Além disso, alguns gatos com infecção por E. canis não fazem seroconversão, e assim, o ensaio de PCR é superior à serologia em gatos. Os ensaios de PCR podem ser desenhados para amplificar cada organismo. Alternativamente, os primers estão disponíveis para amplificar todos os organismos em uma única reação, e então o sequenciamento pode ser usado para determinar as espécies infecciosas. No entanto, os resultados positivos dos testes nem sempre estão correlacionados com a presença de doença. O DNA de Anaplasma phagocytophilum foi amplificado a partir do sangue de gatos saudáveis por mais de 10 semanas após a infecção experimental por exposição a carrapatos Ixodes (MR Lappin, dados não publicados, 2011).
Gatos podem ser infectados por Rickettsia felis e demonstraram ter anticorpos contra R. rickettsii. Febre, dor de cabeça, mialgia e erupção cutânea macular em humanos têm sido atribuídas à infecção por R. felis em vários países do mundo. Em estudo recente em nosso laboratório, nós testamos 92 pares de sangue de gato e extratos de pulga do Alabama, Maryland, e Texas, usando ensaios PCR que amplificam uma região do gene citrato sintase (gltA) e o gene da membrana externa da proteína B (ompB). Dos 92 pares, 62 dos 92 (67,4%) extratos de pulga e nenhuma das amostras de sangue de gatos foram positivas para o DNA de R. felis.11 Em outro estudo, nós mostramos as taxas de prevalência de anticorpos R. felis e R. rickettsii em gatos com febre de 5,6% e 6,6%, respectivamente, mas nenhum dos organismos foi amplificado a partir do sangue.1 Estes resultados provam que os gatos são às vezes expostos, mas mais dados são necessários para determinar a significância das associações de doenças. Se os ensaios de Rickettsia spp. PCR estão indicados para uso em gatos neste momento é desconhecido.
Cultura de sangue, ensaio de PCR em sangue, e testes serológicos podem ser usados para avaliar gatos individuais para infecção por Bartonella spp..3 Gatos que são negativos em cultura ou negativos em PCR e negativos em anticorpos, e gatos que são negativos em cultura ou negativos em PCR e positivos em anticorpos, provavelmente não são uma fonte de pulgas, gatos, ou infecção humana. No entanto, a bacteremia pode ser intermitente e podem ocorrer cultura falso-negativa ou resultados de PCR, limitando o valor preditivo de uma única bateria de testes.17 Embora os testes serológicos possam ser usados para determinar se um gato foi exposto, tanto os gatos seropositivos como os seronegativos podem ser bacterémicos, limitando a utilidade diagnóstica dos testes serológicos. Assim, não é recomendado atualmente testar gatos saudáveis para a infecção por Bartonella.3,14 Os testes devem ser reservados para gatos com suspeita de bartonelose clínica. Como a infecção por Bartonella spp. é tão comum em gatos saudáveis, mesmo resultados positivos em cultura ou PCR-positivos não provam a bartonelose clínica. Por exemplo, embora tenhamos detectado DNA de Bartonella spp. em mais gatos com febre do que em gatos de parelha sem febre, os gatos saudáveis ainda eram comumente positivos.16 A sorologia combinada com PCR na avaliação de gatos com suspeita de bartonelose provavelmente dará o melhor valor preditivo.
O felis de citauxzoon é normalmente facilmente identificado no exame citológico de esfregaços de sangue ou aspirados esplênicos durante a avaliação de gatos clinicamente doentes. Os testes sorológicos não estão disponíveis comercialmente neste momento. A PCR pode ser usada para amplificar o DNA do organismo a partir do sangue de gatos que são citologicamente negativos.9
Os anticorpos contra o vírus da imunodeficiência felina (FIV) são detectados no soro na prática clínica com maior frequência através do ensaio de imunoabsorção enzimática (ELISA). Comparações entre diferentes testes têm mostrado que os resultados da maioria dos ensaios são comparáveis.10 Os resultados do isolamento do vírus ou RT-PCR no sangue são positivos em alguns gatos anti-corpos negativos. Reações falso-positivas podem ocorrer usando ELISA; portanto, resultados positivos do ELISA em gatos saudáveis ou de baixo risco devem ser confirmados usando o imunoensaio Western blot. Os gatos podem ter anticorpos detectáveis, derivados do colostro, durante vários meses. Se os anticorpos persistirem aos 6 meses de idade, é provável que o gatinho esteja infectado. O isolamento do vírus ou RT-PCR no sangue também pode ser realizado para confirmar a infecção. No entanto, o FIV não está presente no sangue em níveis elevados, pelo que são comuns resultados falso-negativos. Além disso, há resultados variáveis entre laboratórios.6
A maioria dos gatos com infecção pelo vírus da leucemia felina é virêmica, e assim, ensaios de diagnóstico molecular não são geralmente necessários na prática clínica. Entretanto, o uso de novos ensaios de PCR mais sensíveis em tempo real tem sido usado para caracterizar com precisão os estágios da infecção.19 Entretanto, estes ensaios não estão disponíveis comercialmente.
RNA de ambos FIPV e FECV podem ser amplificados a partir do sangue dos gatos, e assim, resultados positivos dos testes nem sempre se correlacionam com o desenvolvimento da FIP. A amplificação do mRNA do gene M por RT-PCR teve resultados mistos em dois estudos realizados até o momento. Em um estudo, 13 dos 26 gatos aparentemente normais foram positivos para o mRNA da FECV no sangue, sugerindo que o valor preditivo positivo deste ensaio para o diagnóstico da PIF foi baixo.5