O que é imuno-histoquímica?
Immunohistoquímica (IHC) é considerada uma forma avançada de histopatologia. A imunohistoquímica não é normalmente usada inicialmente, mas é adicionada quando os testes histológicos de rotina/regular são insuficientes para formar um diagnóstico.
IHC usa anticorpos primários para rotular uma proteína, depois usa um anticorpo secundário que está ligado ao primário. Na coloração da imunoperoxidase, um anticorpo é ligado a uma enzima, a peroxidase, que catalisa uma reação na qual a proteína é especificamente corada de castanho. O IHC também pode envolver anticorpos fluorescentes, de modo que, quando visto sob um microscópio de luz, um certo padrão será observado a partir da fluorescência emitida.
O padrão IHC é considerado diagnóstico, demonstrando padrões nucleares, membranosos ou citoplasmáticos. O IHC é frequentemente utilizado em situações em que a presença ou ausência de certas proteínas pode formar uma base para um diagnóstico. Também pode ser usado para distinguir entre dois processos diferentes de doença que de outra forma podem parecer semelhantes ao patologista.
Como é realizada a imuno-histoquímica?
O processo mais comum de preparação de lâminas imuno-histoquímicas é o seguinte:
- Fixação do tecido (em geral, as colorações de IHC são fixadas com formalina)
- Integração do tecido (em parafina)
- Seleção dos tecidos
- Recuperação (feita com a aplicação de calor ou de enzimas proteolíticas)
- Montagem e desidratação
- Limpeza e observação das lâminas.
Quais são as vantagens e desvantagens da imuno-histoquímica?
As vantagens do IHC incluem:
- É possível usar amostras de tecido fresco ou congelado para IHC.
- IHC está bem estabelecido e disponível.
- O custo do IHC é relativamente baixo
- Tem um tempo de retorno rápido.
- Por não estarem envolvidos agentes infecciosos vivos, o risco para a saúde humana é mínimo.
As desvantagens do IHC são as seguintes:
- As manchas de IHC não são padronizadas em todo o mundo.
- Embora o custo do procedimento seja relativamente barato, o equipamento necessário para realizar IHC é caro.
- Quantificar resultados é difícil.
- IHC está sujeito a erro humano. Pessoal bem treinado é fundamental.
Quais são alguns exemplos de manchas imunohistoquímicas?
Centenas de manchas imunohistoquímicas são usadas para identificar diferentes tumores e outras neoplasias. Apenas algumas das manchas de IHC usadas em dermatologia estão listadas abaixo.
| Mancha IHC | Uses/Image caption |
|---|---|
| BCL2 | Usado para distinguir entre carcinomas basocelulares e trichoepiteliomas |
| CD3 | Marcador de células T; fortemente positivo em micose fungoides |
| CD4 | Marcador de células T |
| CD8 | Suppressor T-marcador celular |
| CD20 | Marcador celular B |
| CD30 | Pode ser usado no diagnóstico de linfoma Hodgkin e linfomas anaplásicos. Células grandes: Aparelho de Golgi e coloração membranosa |
| CD31 | Ajuda para identificar tumor endotelial |
| CD34 | Distingue diferentes tumores endoteliais e é positivo em dermatofibrossarcoma |
| CD56 | Usado no diagnóstico de tumores nãoLinfomas de Hodgkin, leucemias e carcinomas de pequenas células |
| CD117 | Marcador para receptor de KIT e positivo em vários tumores incluindo mastocitose |
| CDKN2A (p16) | Marcador supressor de tumor positivo em tumores associados ao HPV, queratoses actínicas e carcinoma espinocelular |
| CK (vários) | As citoceratinas podem ser usadas para ajudar a distinguir tumores benignos de tumores malignos ad anexos |
| CK 20 | Específico para o carcinoma celular de Merkel. Pode ajudar a identificar adenocarcinomas do sistema gastrointestinal e reprodutivo, bem como tumores epiteliais gastrointestinais |
| Cytokeratin High Molecular Weight | Utilizado para detectar carcinomas ductais, carcinomas escamosos e outras neoplasias epiteliais |
| Desmin | Marcador de músculo |
| EMA | Utilizado para identificar neoplasias eccrinas, Doença de Paget e carcinomas sebáceos |
| Factor 13 | Pode ajudar os clínicos a distinguir entre dermatofibrossarcoma e dermatofibroma |
| HHHV8 | Herpesvírus humano 8 |
| HMB 45 | Utilizado para detectar melanócitos, especialmente no melanoma, mas negativo no melanoma desmoplástico |
| Melan-a | Pode ajudar a identificar células melanocíticas naevus e melanomas |
| PDL1 | Morte-ligand programada 1 |
| S-100 | Usado para marcar tumores dos melanócitos, ambos naevi e melanoma |
| SMA | Antígeno muscular suave |
| SOX-10 | Marcador nuclear para tumores melanocíticos |
| Treponema pallidum | Demonstra organismos na sífilis secundária |