Estrutura química da HEPES = N-(2-hidroxietil)
piperazina-N’-
(ácido 2-etanossulfónico)

HEPES é um produto químico tampão comum semelhante ao Tris em tampões Tris-HCl e fosfatos em PBS. Os tampões são utilizados para manter o pH a um certo valor e podem “tamponar” a adição de pequenas quantidades de ácidos/bases.

Propriedade de HEPES

pH estável vs. temperatura, sem grupos de aminas primárias, sem quelação de metais, próximo à faixa de pH fisiológico. HEPES é frequentemente utilizada para manter a solubilidade proteica em experimentos bioquímicos.

  • pKa a 25C de 7,55 (7,31 a 37C); (2º pKa a pH 3 não é de interesse)
  • intervalo de amortecimento utilizável de 6.8 a 8,2
  • peso molecular 238,3 g/mol
  • ΔpKa/ΔT = -.014
  • HEPES contém aminas terciárias, que são reativas sob certas condições.
  • Fórmula química: C8H18N2O4S; N-(2-hidroxietil)-piperazina-N’-(ácido 2-etanossulfónico); Ácido 4-(2-hidroxietil)-1-piperazina-etanossulfónico; número CAS: 7365-45-9

Buffers são tipicamente 1 M, preparados neutralizando HEPES com hidróxido de sódio. HEPES é essencialmente insolúvel até ser neutralizado.

1M tampão HEPES KOH 7,5

  • 700 ml de água ultra pura
  • 238.3 g HEPES
  • KOH (hidróxido de potássio) pellets para ajustar o pH a 7,5
  • para 1L com água ultra pura; esterilizar por filtração

1M HEPES-NaOH pH 7.5

  • 700 ml de água ultra pura
  • 238,3 g HEPES
  • ~5,5 g NaOH (hidróxido de sódio) pellets para ajustar o pH a 7,5
  • para 1L w de água ultra pura; esterilizar por filtração

Links

  • publicações originais: Good’66 PMID 5942950, Good’74 PMID 4206745, Blanchard’84 PMID 6717292
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  • Wikipedia: solução tampão
  • CP: amortecedores comuns
  • Lista de amortecedores comuns do Smith College

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