Explicar o que está acontecendo
Própósito que você leu a explicação para o que acontece durante a cromatografia em camada fina. Se você não leu, siga o primeiro link no topo da página e volte a este ponto depois.
O composto azul é obviamente mais polar do que o amarelo – talvez até tenha a capacidade de se ligar ao hidrogênio. Você pode dizer isso porque o composto azul não percorre a coluna muito rapidamente. Isso significa que ele deve adsorver mais fortemente ao gel de sílica ou alumina do que ao amarelo. O amarelo menos polar passa mais tempo no solvente e, portanto, passa através da coluna muito mais rapidamente.
O processo de lavagem de um composto através de uma coluna usando um solvente é conhecido como eluição. O solvente às vezes é conhecido como eluente.
E se você quiser coletar o composto azul também?
Vai levar muito tempo para lavar o composto azul na velocidade em que ele está viajando no momento! No entanto, não há razão para não poder trocar o solvente durante a eluição.
Ponha substituir o solvente que tem estado a usar por um solvente mais polar uma vez que o amarelo tenha sido todo recolhido. Isso terá dois efeitos, ambos irão acelerar o composto azul através da coluna.
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O solvente polar irá competir por espaço no sílica-gel ou alumina com o composto azul. Qualquer espaço temporariamente ocupado por moléculas de solvente na superfície da fase estacionária não está disponível para as moléculas azuis aderirem e isto tenderá a mantê-las em movimento no solvente.
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Haverá uma maior atração entre as moléculas de solvente polar e as moléculas de azul polar. Isto tenderá a atrair quaisquer moléculas azuis aderindo à fase estacionária de volta à solução.
O efeito líquido é que com um solvente mais polar, o composto azul gasta mais tempo em solução, e assim se move mais rapidamente.
Por que não usar este solvente alternativo em primeiro lugar? A resposta é que se ambos os compostos da mistura viajarem rapidamente através da coluna desde o início, provavelmente não conseguirá uma separação tão boa.
E se tudo na sua mistura for incolor?
Se fosse utilizar a cromatografia em coluna para purificar o produto de uma preparação orgânica, é bastante provável que o produto que pretende seja incolor mesmo que uma ou mais das impurezas seja colorido. Vamos assumir o pior caso de que tudo é incolor.
Como você sabe quando a substância que você quer chegou ao fundo da coluna?
Não há uma maneira rápida e fácil de fazer isso! O que você faz é recolher o que sai do fundo da coluna numa série inteira de tubos rotulados. O tamanho de cada amostra dependerá obviamente do tamanho da coluna – poderá recolher amostras de 1 cm3 ou 5 cm3 ou o que for mais apropriado.
Pode então retirar uma gota de cada solução e fazer um cromatograma de camada fina a partir dela. Você colocaria a gota na linha de base ao lado de uma gota de uma amostra pura do composto que você está fazendo. Ao fazer isto repetidamente, você pode identificar quais das suas amostras coletadas no fundo da coluna contêm o produto desejado, e apenas o produto desejado.
Após saber isto, você pode combinar todas as amostras que contêm o seu produto puro, e então remover o solvente. (Como separaria o solvente do produto não é directamente relevante para este tópico e variaria dependendo da sua natureza exacta – por isso nem sequer vou tentar uma generalização.)