HEPES kémiai szerkezete = N-(2-hidroxietil)
piperazin-N’-
(2-etánszulfonsav)
piperazin-N’-
(2-etánszulfonsav)
A HEPES a Tris-HCl pufferekben lévő Trishez és a PBS-ben lévő foszfátokhoz hasonló gyakori pufferkémiai anyag. A puffereket arra használják, hogy a pH-t egy bizonyos értéken tartsák, és kis mennyiségű savak/bázisok hozzáadásával “pufferelni” tudják.
A HEPES tulajdonsága
Szabályos pH a hőmérséklet függvényében, nincsenek primer amincsoportok, nincs fémkeláció, közel a fiziológiás pH-tartományhoz. A HEPES-t gyakran használják a fehérjék oldhatóságának fenntartására biokémiai kísérletekben.
- pKa 25C-on 7,55 (37C-on 7,31); (2. pKa pH 3-nál nem érdekes)
- használható pufferelési tartomány 6.8 és 8,2 között
- molekulatömeg 238,3 g/mol
- ΔpKa/ΔT = -,014
- HEPES tercier aminokat tartalmaz, amelyek bizonyos körülmények között reaktívak.
- Kémiai képlet: C8H18N2O4S; N-(2-hidroxietil)-piperazin-N’-(2-etánszulfonsav); más néven 4-(2-hidroxietil)-1-piperazin-etánszulfonsav; CAS-szám: 7365-45-9
A pufferek általában 1 M-esek, a HEPES nátrium-hidroxiddal történő semlegesítésével készülnek. A HEPES lényegében oldhatatlan, amíg nem semlegesítik.
1M HEPES KOH puffer 7,5
- 700 ml ultratiszta víz
- 238.3 g HEPES
- KOH (kálium-hidroxid) pellet a pH 7,5-re való beállításához
- 1 l w ultratiszta vízhez; szűréssel sterilizáljuk
1M HEPES-NaOH pH 7.5
- 700 ml ultratiszta víz
- 238,3 g HEPES
- ~5,5 g NaOH (nátrium-hidroxid) pellet a pH 7,5-re való beállításához
- 1L w ultratiszta vízhez; sterilizáljuk szűréssel
Linkek
- eredeti publikációk: Good’66 PMID 5942950, Good’74 PMID 4206745, Blanchard’84 PMID 6717292
- Wikipedia: pufferoldat
- CP: gyakori pufferek
- List of common buffers from Smith College
Közönséges pufferek listája a Smith College-tól