Chemische Struktur von HEPES = N-(2-Hydroxyethyl)
piperazin-N‘-
(2-Ethansulfonsäure)
piperazin-N‘-
(2-Ethansulfonsäure)
HEPES ist eine gängige Pufferchemikalie, ähnlich wie Tris in Tris-HCl-Puffern und Phosphate in PBS. Puffer werden verwendet, um den pH-Wert auf einem bestimmten Wert zu halten und können die Zugabe kleiner Mengen von Säuren/Basen „puffern“.
Eigenschaft von HEPES
Stabiler pH-Wert in Abhängigkeit von der Temperatur, keine primären Amingruppen, keine Metallchelatbildung, nahe dem physiologischen pH-Bereich. HEPES wird häufig zur Aufrechterhaltung der Proteinlöslichkeit in biochemischen Experimenten verwendet.
- pKa bei 25C von 7,55 (7,31 bei 37C); (2. pKa bei pH 3 ist nicht von Interesse)
- verwendbarer Pufferbereich von 6.8 bis 8,2
- Molekulargewicht 238,3 g/mol
- ΔpKa/ΔT = -.014
- HEPES enthält tertiäre Amine, die unter bestimmten Bedingungen reaktiv sind.
- Chemische Formel: C8H18N2O4S; N-(2-Hydroxyethyl)-piperazin-N‘-(2-ethansulfonsäure); auch bekannt als 4-(2-Hydroxyethyl)-1-piperazinethansulfonsäure; CAS-Nummer: 7365-45-9
Puffer sind in der Regel 1 M, hergestellt durch Neutralisierung von HEPES mit Natriumhydroxid. HEPES ist im Wesentlichen unlöslich, bis es neutralisiert wird.
1M HEPES KOH-Puffer 7,5
- 700 ml Reinstwasser
- 238.3 g HEPES
- KOH (Kaliumhydroxid) Pellets zur Einstellung des pH-Wertes auf 7,5
- auf 1L w Reinstwasser; durch Filtration sterilisieren
1M HEPES-NaOH pH 7.5
- 700 ml Reinstwasser
- 238,3 g HEPES
- ~5,5 g NaOH (Natriumhydroxid) Pellets zur Einstellung des pH-Wertes auf 7,5
- auf 1L w Reinstwasser; durch Filtration sterilisieren
Links
- Originalpublikationen: Good’66 PMID 5942950, Good’74 PMID 4206745, Blanchard’84 PMID 6717292
- Wikipedia: buffer solution
- CP: common buffers
- List of common buffers from Smith College