Bloodborne Agents
Mycoplasma haemofelis (Mhf), „Candidatus Mycoplasma haemominutum” (Mhm) și „Candidatus M. turicensis” (Mtc) pot fi găsite la pisici. La pisicile infectate experimental, Mhf este aparent mai patogen decât Mhm. Se pare că Mtc are o patogenitate intermediară. Diagnosticul se bazează pe demonstrarea organismului pe suprafața eritrocitelor la examinarea unei pelicule subțiri de sânge sau pe testul PCR. Numărul de organisme fluctuează și, prin urmare, examinarea peliculei de sânge poate fi fals negativă până la 50 % din timp. Organismul poate fi dificil de găsit citologic, în special în faza cronică. Astfel, testele PCR sunt testele de elecție datorită sensibilității.13 Sunt disponibili primeri care pot amplifica toate cele trei hemoplasme. Testele PCR în timp real pot fi utilizate pentru a monitoriza numărul de copii în timpul și după tratament, dar nu au o sensibilitate, o specificitate sau o valoare predictivă mai mare decât testele PCR convenționale.32 Testele PCR trebuie luate în considerare în evaluarea pisicilor cu febră sau anemie inexplicabilă care sunt negative la citologie. În plus, Colegiul American de Medicină Internă Veterinară (American College of Veterinary Internal Medicine – ACVIM) recomandă depistarea pisicilor în vederea utilizării ca donatori de sânge prin teste PCR pentru hemoplasme.35 Multe pisici (aproximativ 15%) sunt purtătoare ale Candidatus M. haemominutum, relativ nepatogen, și astfel, este posibil ca rezultatele pozitive ale testelor să nu se coreleze întotdeauna cu prezența bolii (VPP slabă).
Pe pisici pot fi infectate de organisme asemănătoare cu E. canis2 și Anaplasma phagocytophilum.15 Se cunosc puține lucruri despre ceilalți agenți din aceste genuri în ceea ce privește pisicile. Deoarece organismele sunt din genuri diferite, reactivitatea încrucișată serologică este variabilă. Astfel, deși sindroamele clinice pot fi similare, nu există un singur test serologic pentru a documenta infecția, iar în prezent nu există o serologie standardizată pentru pisici. În plus, unele pisici cu infecție cu E. canis nu se seroconvertesc și, prin urmare, testul PCR este superior serologiei la pisici. Testele PCR pot fi concepute pentru a amplifica fiecare organism. Alternativ, sunt disponibili amorse pentru amplificarea tuturor organismelor într-o singură reacție, iar apoi se poate utiliza secvențierea pentru a determina specia infecțioasă. Cu toate acestea, rezultatele pozitive ale testelor nu sunt întotdeauna corelate cu prezența bolii. ADN-ul Anaplasma phagocytophilum a fost amplificat din sângele pisicilor sănătoase timp de peste 10 săptămâni după o infecție experimentală prin expunerea la căpușe Ixodes (MR Lappin, date nepublicate, 2011).
Pisicile pot fi infectate de Rickettsia felis și s-a demonstrat că au anticorpi împotriva R. rickettsii. Febra, durerile de cap, mialgia și erupția maculară la om au fost atribuite infecției cu R. felis în mai multe țări din întreaga lume. În cadrul unui studiu recent efectuat în laboratorul nostru, am analizat 92 de perechi de sânge de pisică și extracte de purici din Alabama, Maryland și Texas, folosind teste PCR care amplifică o regiune a genei citrat-sintetazei (gltA) și a genei proteinei B a membranei externe (ompB). Din cele 92 de perechi, 62 din 92 (67,4 %) de extracte de purici și niciuna dintre probele de sânge de pisică nu au fost pozitive pentru ADN-ul R. felis.11 Într-un alt studiu, am arătat că ratele de prevalență a anticorpilor R. felis și R. rickettsii la pisicile cu febră au fost de 5,6 % și, respectiv, 6,6 %, dar niciunul dintre organisme nu a fost amplificat din sânge.1 Aceste rezultate dovedesc că pisicile sunt uneori expuse, dar sunt necesare date suplimentare pentru a determina semnificația asociațiilor de boală. Nu se știe dacă testele PCR pentru Rickettsia spp. sunt indicate pentru utilizarea la pisici în acest moment.
Cultura de sânge, testul PCR pe sânge și testele serologice pot fi folosite pentru a evalua pisicile individuale pentru infecția cu Bartonella spp. 3 Pisicile care sunt negative la cultură sau PCR negative și anticorpi negativi, precum și pisicile care sunt negative la cultură sau PCR negative și anticorpi pozitivi, probabil că nu sunt o sursă de infecție cu purici, pisici sau oameni. Cu toate acestea, bacteriemia poate fi intermitentă și pot apărea rezultate fals negative la cultură sau PCR, ceea ce limitează valoarea predictivă a unei singure baterii de teste.17 Deși testele serologice pot fi utilizate pentru a determina dacă o pisică individuală a fost expusă, atât pisicile seropozitive, cât și cele seronegative pot fi bacteriemice, ceea ce limitează utilitatea diagnostică a testelor serologice. Astfel, testarea pisicilor sănătoase pentru depistarea infecției cu specii Bartonella nu este recomandată în prezent.3,14 Testarea ar trebui rezervată pisicilor cu suspiciune de bartoneloză clinică. Deoarece infecția cu Bartonella spp. este atât de frecventă la pisicile sănătoase, chiar și rezultatele pozitive la cultură sau PCR pozitive nu dovedesc existența unei bartoneloze clinice. De exemplu, deși am detectat ADN de Bartonella spp. la un număr mai mare de pisici cu febră decât la pisicile fără febră din pereche, pisicile sănătoase au fost totuși frecvent pozitive.16 Este probabil ca serologia combinată cu PCR în evaluarea pisicilor cu suspiciune de bartoneloză să ofere cea mai bună valoare predictivă.
Cytauxzoon felis este, de obicei, ușor de identificat la examinarea citologică a frotiurilor de sânge sau a aspiratelor splenice în timpul evaluării pisicilor clinic bolnave. Testarea serologică nu este disponibilă în comerț în acest moment. PCR poate fi utilizată pentru a amplifica ADN-ul organismului din sângele pisicilor care sunt negative la citologie.9
Anticorpii împotriva virusului imunodeficienței feline (FIV) sunt detectați în ser în practica clinică cel mai frecvent prin testul imunoenzimatic (ELISA). Comparațiile între diferite teste au arătat că rezultatele majorității testelor sunt comparabile.10 Rezultatele izolării virusului sau ale RT-PCR pe sânge sunt pozitive la unele pisici cu anticorpi negativi. Cu ajutorul testului ELISA pot apărea reacții fals pozitive; prin urmare, rezultatele pozitive ale testului ELISA la pisicile sănătoase sau cu risc scăzut ar trebui să fie confirmate cu ajutorul imunoanalizei Western blot. Puii de pisică pot avea anticorpi detectabili, derivați din colostru, timp de câteva luni. În cazul în care anticorpii persistă la vârsta de 6 luni, este probabil ca pisoiul să fie infectat. Izolarea virusului sau RT-PCR pe sânge pot fi, de asemenea, efectuate pentru a confirma infecția. Cu toate acestea, FIV nu este prezent în sânge la niveluri ridicate și, prin urmare, rezultatele fals-negative sunt frecvente. În plus, există rezultate variabile de la un laborator la altul.6
Majoritatea pisicilor cu infecție cu virusul leucemiei feline sunt viremice și, prin urmare, testele de diagnostic molecular nu sunt de obicei necesare în practica clinică. Cu toate acestea, utilizarea unor teste PCR în timp real mai noi și mai sensibile a fost utilizată pentru a caracteriza cu precizie stadiile infecției.19 Totuși, aceste teste nu sunt disponibile în mod obișnuit în comerț.
ARN-ul atât al FIPV, cât și al FECV poate fi amplificat din sângele pisicilor și, prin urmare, rezultatele pozitive ale testelor nu se corelează întotdeauna cu dezvoltarea FIP. Amplificarea ARNm al genei M prin RT-PCR a avut rezultate mixte în două studii efectuate până în prezent. Într-unul dintre studii, 13 din 26 de pisici aparent normale au fost pozitive pentru ARNm al FECV în sânge, ceea ce sugerează că valoarea predictivă pozitivă a acestui test pentru diagnosticul de PIF a fost scăzută.5
.