Abstract
Obiectiv. Să clarificăm efectul Lactobacillus plantarum 299v asupra nivelurilor de cortizol salivar și IgA salivare la adulții tineri supuși stresului de examinare. Design. Patruzeci și unu de studenți cu un examen academic iminent au fost incluși într-un studiu randomizat, dublu-orb, controlat cu placebo. Bacteria probiotică sau produsul placebo a fost administrat în capsule o dată pe zi, timp de 14 zile. Saliva a fost colectată și a fost completat un test de stres perceput la fiecare ocazie de eșantionare. Saliva a fost colectată pentru analiza cortizolului prin imunoanaliză prin electrochimiluminiscență (ECLI), iar IgA salivară a fost analizată prin testul de imunoabsorbție legată de enzime (ELISA). Abundența lactobacililor a fost evaluată prin cultivarea salivei pe un mediu selectiv, iar identificarea L. plantarum 299v a fost realizată pe colonii selectate aleatoriu printr-o amplificare aleatorie a ADN polimorfic (RAPD) de tipare. Rezultate. S-a constatat o diferență semnificativă a nivelului de cortizol între grupul de tratament și grupul placebo (), împreună cu o creștere semnificativă a nivelului de lactobacili în grupul de tratament comparativ cu grupul placebo (). Nu s-au constatat modificări semnificative pentru IgA salivare. Concluzie. O bacterie probiotică cu capacitatea de a reduce simptomele sindromului intestinului iritabil (SII) a interzis creșterea nivelului de cortizol, marker de stres, în timpul perioadei de examinare. Numărul de înregistrare al studiului este NCT02974894, iar studiul este înregistrat la ClinicalTrials.gov.
1. Introducere
Există o legătură între tractul digestiv și stresul fiziologic, iar cortizolul salivar și imunoglobulina salivară A (IgA salivară) pot fi luate ca markeri de stres . Cortizolul este un hormon steroidic eliberat de suprarenale ca răspuns la stres, iar nivelurile crescute au fost legate de suprimarea sistemului imunitar . IgA salivară face parte din apărarea imunitară orală și este cel mai abundent anticorp din salivă, predominant sub formă de IgA secretorie . Glandele salivare minore, poziționate de-a lungul mucoasei bucale, secretă aproximativ 30-35% din toate IgA salivare care apar în saliva întreagă a adultului .
Probioticele sunt definite ca fiind „microorganisme vii care, atunci când sunt administrate în cantități adecvate, conferă un beneficiu pentru sănătate gazdei” . L. plantarum 299v a demonstrat în studii anterioare un efect pozitiv asupra simptomelor sindromului intestinului iritabil (IBS), cum ar fi balonarea și durerea . S-a demonstrat, de asemenea, că această tulpină contracarează scurgerea intestinelor, ceea ce, la rândul său, ar putea atenua răspunsul axei hipotalamo-hipofizo-suprarenale (HPA) la stres . Nu au fost efectuate studii anterioare privind efectul L. plantarum 299v asupra stărilor legate de stres. Cu toate acestea, s-a demonstrat la puii de șobolan stresați de separarea de mamele lor că un amestec probiotic de Lactobacillus rhamnosus R0011 și Lactobacillus helveticus R0052 a redus semnificativ nivelurile de corticosteron, analogul cortizolului, în sângele animalelor . De asemenea, șobolanii supuși la un factor de stres acut limitat în timp au devenit mai puțin stresați după tratamentul cu Lactobacillus farciminis , împreună cu scăderea nivelurilor de lipopolizaharide (LPS) în sânge .
Nu se cunosc prea multe despre efectele bacteriilor probiotice asupra markerilor de stres din salivă, în ciuda faptului că prelevarea de probe de salivă este o metodă ușoară și neinvazivă, care nu provoacă niciun rău sau disconfort persoanei testate. Acest lucru este deosebit de important atunci când se evaluează markerii de stres în cazul în care o creștere acută s-ar putea datora metodei de prelevare a probelor și nu agentului de stres acut evaluat în cadrul studiului. Când vine vorba de efectele probioticelor asupra nivelurilor de IgA salivare, majoritatea studiilor sunt legate de incidența diferitelor infecții respiratorii , iar, într-un studiu anterior, s-a raportat că nivelurile de IgA secretorie din scaune au crescut într-un grup de copii care au primit un produs care conținea L. rhamnosus HN001 în comparație cu un grup placebo . Rezultate similare au fost obținute cu tulpina L. rhamnosus GG .
Stresul cronic este legat de creșterea nivelului de cortizol, dar dacă cortizolul este un agent cauzal pentru reacțiile fiziologice de stres sau doar o consecință a acestuia este deschis la discuție . Eliberarea de cortizol este un răspuns periferic întârziat la un stres acut și se sugerează că cortizolul exercită atât acțiuni stimulatoare, cât și supresoare asupra răspunsului organismului la stres. Un exemplu de acțiune stimulatoare este declanșarea activării cardiovasculare ; cu toate acestea, ca răspuns, de exemplu, la un factor de stres de tip hemoragie, cortizolul suprimă răspunsul de diminuare a volumului de lichid prin inhibarea secreției inițiale rapide de hormoni de stres vasoconstrictori . În ceea ce privește proprietățile de reglare imunitară ale cortizolului, se sugerează că secreția sa protejează împotriva „depășirii” răspunsului imunitar care, în caz contrar, are loc ca răspuns la stres . Cu toate acestea, nu este încă clar care sunt scopurile pe care nivelul crescut de cortizol le servește în timpul răspunsului organismului la stres .
În studiul de față, scopul principal a fost de a clarifica efectul bacteriei probiotice Lactobacillus plantarum 299v asupra nivelului de cortizol salivar la adulții tineri supuși stresului de examinare. IgA salivare din glandele minore și în saliva umană integrală au fost măsurate ca markeri alternativi ai stresului. Ipoteza a fost că nivelurile de cortizol vor fi reduse sau stabilizate în grupul de testare, în comparație cu grupul placebo, unde se aștepta ca nivelurile de cortizol să crească din cauza stresului indus de examen. În schimb, era de așteptat ca nivelurile de IgA salivare să crească în grupul de testare în comparație cu grupul placebo.
2. Materiale și metode
2.1. Designul studiului
În prezentul studiu randomizat, dublu-orb, controlat cu placebo, au participat studenți voluntari de la Universitatea Lund, cu vârste cuprinse între 18 și 30 de ani, în timpul perioadei de examene. Criteriile de excludere au fost sarcina, precum și administrarea de antibiotice și medicație temporară cu cortizon în timpul perioadei de studiu. A fost efectuat un calcul de putere pentru a decide cantitatea de subiecți, iar 40 de persoane au fost considerate suficiente. 42 de tineri adulți sănătoși s-au oferit voluntari la studiu, 28 de femei și 14 bărbați, iar toți participanții și-au dat consimțământul informat și semnat pentru studiu. După ce un bărbat a abandonat, 41 de indivizi au finalizat întreaga perioadă experimentală. 21 au primit produsul de testare în doză zilnică de 1 1010 unități formatoare de colonii de L. plantarum 299v în capsule (L. plantarum 299v, amidon de cartof, hidroxipropil metilceluloză și stearat de magneziu, (Probi AB, Lund, Suedia)) și 20 au primit capsule placebo, care conțineau aceleași ingrediente ca și produsul de testare, cu excepția bacteriilor. Înainte de începerea perioadei experimentale, a existat o perioadă de spălare de două săptămâni în care participanții au fost instruiți să evite consumul de produse probiotice. Consumul capsulei a avut loc ulterior o dată pe zi, după prânz, iar subiecții au fost rugați să nu mănânce, să bea, să fumeze sau să ia tutun de prizat timp de o oră după consum. De asemenea, participanții au fost instruiți fie să mestece capsula până când pulberea se dizolvă în gură (minimum 30 de secunde), fie să golească capsula pe o lingură și să mestece pulberea timp de 30 de secunde înainte de a o ingera. Probele de referință pentru toți participanții au fost colectate în ziua 0, înainte de orice ingerare a produsului. Studiul a continuat timp de 14 zile, iar data de începere a studiului a fost decisă individual pentru toți participanții, într-un interval de 1,5 săptămâni.
2.2. Evaluare psihologică
A fost inclusă o evaluare psihologică pentru ca subiecții testului să își evalueze stresul autoperceput. A fost utilizat un chestionar cu 30 de întrebări elaborat de Levenstein et al. iar scorul mai mic obținut indică un grad mai mic de stres și viceversa. Un indice care dă un număr între 0 și 1 a fost calculat folosind următoarele :
2.3. Prelevarea de probe de salivă
Saliva din glandele minore a fost colectată din zonele mucoasei labiale inferioare, așa cum s-a descris anterior, iar saliva întreagă a fost recoltată în aceeași zi de prelevare. Pentru a reduce influența variațiilor circadiene ale secreției salivare în timpul recoltării, toate prelevările au fost efectuate între orele 15 și 17. Toate probele au fost recoltate în ziua 0 și în ziua 14 și, în zilele 5 și 10, au fost prelevate doar probe de cortizol. Participanții au fost instruiți să nu mănânce, să bea, să ia tutun de prizat, să fumeze, să se spele pe dinți sau să facă orice fel de exerciții fizice cu o oră înainte de momentul prelevării. De asemenea, alcoolul a fost interzis cu douăsprezece ore înainte de programarea pentru recoltarea probei.
2.4. Analiza cortizolului
Prelevarea de salivă pentru analiza cortizolului a fost efectuată cu o Salivette® pentru cortizol (Sarstedt, Germania) și a fost făcută după recoltarea de salivă pentru analiza IgA. Participanții au fost instruiți să circule cu saliva în gură timp de 2-5 min, până când aceasta a fost umplută cu salivă și apoi să o scuipe cu grijă înapoi în tub. Tuburile au fost puse la gheață și ulterior congelate la -20°C până la analiză. Analiza cortizolului a fost efectuată de Labmedicin Skåne (laboratoarele universitare și regionale din regiunea Skåne, Suedia) și a fost realizată în conformitate cu acreditarea. Metoda utilizată a fost un test de competiție într-o singură etapă cu tehnica de detecție Electrochemiluminescence Immunoassay (ECLI) bazată pe un derivat de ruteniu (Ru) .
2.5. Analiza IgA salivare
Saliva din glandele minore a fost colectată de pe buza inferioară cu ajutorul unei benzi SialoPaper® (Oraflow Inc., New York, SUA) și plasată ușor pe mucoasă timp de 60 s, iar volumul salivar din interiorul benzii a fost măsurat cu ajutorul unui Periotron® 8000 (Oraflow Inc., New York, SUA). Banda SialoPaper a fost pusă în 1 ml de PBS (1,5 ml PP, Sarstedt, Germania; Phosphate Buffered Saline, Dulbecco A, Oxoid, Anglia) la gheață și depozitată la -80°C până la analiză. Saliva întreagă nestimulată a fost colectată după prelevarea de probe de salivă a glandei minore. Participanții s-au așezat, înclinându-se ușor în față, și au lăsat saliva să se scurgă într-un microtub de 2 mL cu ajutorul unui pai steril (pipete sterile de unică folosință de 1 mL, Kemikalia, Suedia; 2 mL PP, Sarstedt, Germania). Toate probele au fost păstrate la -80°C până la analiză.
Concentrația de IgA secretată în salivă este relativă la cantitatea totală de proteine și, prin urmare, unitatea % IgA/proteine totale este aleasă pentru a reprezenta rezultatul analizei întregii saliva. Acest lucru este relevant deoarece secreția de IgA se modifică odată cu debitul salivar, care, la rândul său, se modifică în funcție de stimulii asupra sistemului nervos autonom, de exemplu, stresul acut, stresul cronic și odihna. Această modificare a debitului este luată în considerare prin măsurarea procentului de IgA/proteine totale din salivă, ceea ce o face să fie o metodă precisă atunci când se compară datele de la diferiți subiecți testați .
Pentru a analiza concentrația salivară de IgA, s-a efectuat un sandwich-ELISA modificat conform lui Krzywkowski și colab. , folosind IgA de capră antiumană specifică lanțului α1 și α2 (5 μg/mL, Sigma I0884; Sigma Chemical Co, St Louis, MO, SUA) conjugat cu fosfatază alcalină (Sigma A9669; diluat 1 : 30.000 în PBST). Concentrația totală de proteine a fost analizată cu ajutorul unui test rapid de testare a proteinelor (BIO-RAD) .
IGA salivare din saliva glandei minore a fost exprimată în mg/100 ml. Analiza IgA salivare a fost efectuată la Facultatea de Odontologie din cadrul Universității Malmö (Malmö, Suedia).
2.6. Numărarea pe plăci a lactobacililor
Pentru a analiza lactobacilii bucali, subiecții testați au mestecat o pastilă de parafină (Orion Diagnostics) pentru a stimula secreția de salivă, iar recoltarea s-a făcut în același mod ca și pentru IgA salivare în saliva întreagă. Colectarea acestei probe de salivă s-a făcut la sfârșitul fiecărei ocazii de prelevare, deoarece această metodă de prelevare dă salivă puternic stimulată, spre deosebire de celelalte metode. Tuburile au fost puse la gheață și 0,25 ml din proba de salivă a fost transferată într-un alt microtub steril (1,5 ml PP, Sarstedt, Germania) care conținea 0,5 ml de mediu de congelare. Ambele tuburi au fost păstrate la -80°C până la analiză.
Abundența lactobacililor a fost evaluată prin numărarea pe plăci. Probele au fost diluate și întinse pe plăci de agar Rogosa (Oxoid, Anglia), iar plăcile au fost incubate la 37°C timp de 72 de ore în condiții anaerobe (2,5 L, AnaeroGen™, Oxoid). Două colonii din fiecare placă au fost alese la întâmplare și recultivate. Izolatele au fost congelate și depozitate în medii de congelare la -80°C.
2.7. Identificarea L. plantarum 299v
Pentru extragerea ADN-ului din fiecare izolat, probele au fost decongelate și vortexate cu puțin timp înainte de adăugarea a 1 ml de apă MilliQ sterilă și centrifugarea la viteză maximă (14 800 g, 1 min). Supernatantul a fost îndepărtat și s-a adăugat încă 0,25 ml de apă MilliQ sterilă. Extractul celular rămas a fost măcinat ușor cu bile de sticlă Assistent® sterile (Ø 2 mm, Glaswarenfabrik Karl Hecht, Germania) într-un agitator (6°C, 30 min) și toate probele au fost apoi folosite într-o reacție de amplificare aleatorie a ADN polimorf (RAPD), pentru a studia prezența L. plantarum 299v. S-a preparat un amestec principal pentru 35 de probe care include 175 μL de tampon (Qiagen, Germania), 35 μL de dNTP (Roche Diagnostics, Germania), 35 μL de Primer 73 (Qiagen, Germania) și 8,75 μL de Taq-Polimerază (Qiagen, Germania). În fiecare tub PCR (Gene Amp 0,5 ml, Applied Biosystems, Singapore) s-au adăugat 7,25 μL de mastermix, împreună cu 42,75 μL de H2O și 1 μL de supernatant din probe.
Reacția RAPD a fost realizată într-un aparat PCR (Perkin Elmer, DNA Thermal Cycler, SUA) în conformitate cu Quednau et al. Gelurile pentru electroforeza pe gel au fost pregătite prin adăugarea a 0,75 g de Agaroză DNA Grade Electran® (VWR, Belgia) în 50 ml de tampon TB; apoi soluția a fost încălzită până la fierbere și turnată în rezervoare de gel pentru a se răci. În final, gelurile au fost puse în tăvi de gel cu tampon TB. 2-5 μL din fiecare probă au fost adăugate în fiecare puț împreună cu 3 μL de tampon de încărcare înainte de efectuarea electroforezei (100 V, 1 h). Gel Redx3 (Biotium Inc., SUA), 1 ml în 99 ml dH2O, a fost utilizat timp de 20 min pentru a colora gelurile, iar fotografiile au fost realizate în conformitate cu Quednau et al. .
2.8. Calcule statistice
Datele au fost evaluate din punct de vedere statistic folosind o analiză de varianță (ANOVA) Kruskal-Wallis One-Way One-Way Analysis of Variance (ANOVA) pe ranguri sau un test Mann-Whitney Ranks Sum atunci când a fost cazul. A -testul a fost utilizat pentru compararea pe perechi a concentrațiilor absolute de IgA, precum și a nivelurilor absolute de cortizol. Instrumentele statistice au fost Sigma Plot (11.0 și 12.0) și Excel 2013. În plus, s-a efectuat un test de incidență privind apariția L. plantarum 299v cu testul Fisher Exact, utilizând QuickStat (2.6). Datele au fost prezentate sub formă de mediană și interval interquartil, precum și de medie și deviație standard. Valorile minime și maxime pentru probele de cortizol au fost șterse pentru a elimina impactul valorilor aberante, deoarece în date se putea observa o deviație clară. Aceasta se referea doar la probele de cortizol. Valorile aparținând participanților care nu au îndeplinit toate cerințele studiului au fost controlate și nu s-au constatat abateri. Prin urmare, rezultatele acestora au fost incluse.
2.9. Permisiune etică
Studiul a fost aprobat de Comitetul regional de evaluare etică din Lund (Ref 2013/166), iar considerentele etice au inclus beneficiile și riscurile cu produsul utilizat și posibilitatea existenței unor relații personale deja existente între personalul responsabil de testare și subiecții care au efectuat studiul.
3. Rezultate
3.1. Evaluarea evaluării psihologice
Evaluarea psihologică nu a arătat nici o diferență semnificativă a stresului perceput între grupuri și, în plus, nu a existat nici o diferență semnificativă în cadrul fiecărui grup atunci când se compară diferitele zile de eșantionare.
3.2. Nivelurile de cortizol în salivă
Nivelurile absolute de cortizol (nM) în ziua de referință (ziua 0) au fost de 9,18 (±2,50) pentru grupul placebo și de 9,47 (±2,96) pentru grupul de testare, fără diferențe semnificative între cele două grupuri (). Atunci când modificarea relativă a nivelurilor mediane de cortizol a fost comparată cu o valoare de referință în ziua 0 (valoarea inițială), s-a constatat o diferență semnificativă între grupuri în ziua 10 (; Figura 1). Nu s-a constatat nicio semnificație în cadrul grupurilor.
3.3. Concentrațiile de IgA în salivă
Nivelurile absolute de IgA (mg/100 ml) în saliva glandei minore în ziua de referință (ziua 0) au fost de 1,99 (±3,76) pentru grupul placebo și de 4,80 (±9,17) pentru grupul de testare, fără diferențe semnificative între cele două grupuri (). Nivelurile absolute de IgA (% IgA/proteine totale) în întreaga salivă în ziua de referință (ziua 0) au fost de 25,3 (±7,37) pentru grupul placebo și de 27,1 (±12,2) pentru grupul de testare, fără diferențe semnificative între cele două grupuri (). Spre deosebire de modificarea nivelurilor de cortizol, concentrațiile mediane de IgA salivare în saliva integrală sau în saliva din glandele minore nu au fost afectate de consumul de probiotice; adică, nu a fost evidențiată nicio diferență semnificativă între grupul probiotic și grupul placebo (figurile 2 și 3, resp.).
3.4. Numărătoarea viabilă a lactobacililor și identificarea L. plantarum 299v
În ziua 14 a existat o creștere semnificativă a abundenței lactobacililor în saliva subiecților care au consumat probiotice în comparație cu cei cărora li s-a administrat produsul placebo (). Creșterea a fost, de asemenea, semnificativă () în cadrul grupului probiotic atunci când s-a comparat ziua de referință cu ziua finală de prelevare a probioticelor (, Figura 4). Incidența izolatelor identificate ca fiind L. plantarum 299v a fost semnificativ crescută în ziua 14 la persoanele cu niveluri detectabile de lactobacili, atât în comparație cu grupul placebo, cât și cu linia de bază ().
4. Discuție
Majoritatea participanților au avut examenul înainte de sfârșitul studiului, ceea ce a dus la un vârf aparent, dar nu semnificativ (), al stresului perceput în ziua 10 pentru grupul placebo. Acest lucru coincide cu vârful concentrației de cortizol salivar în grupul placebo în ziua 10 (figura 1). În schimb, nu s-a observat niciun vârf în grupul probiotic, ceea ce sugerează că consumul de probiotice a avut un efect asupra stresului văzut ca secreție de cortizol de la suprarenale. În ziua 14, mulți dintre voluntari își terminaseră examenele și, prin urmare, era de așteptat o scădere a cortizolului, deoarece cortizolul răspunde relativ rapid la factorii de stres acut.
Stresul academic, aici sub forma unei perioade de examene, nu poate fi considerat ca fiind un stres cronic, deoarece participanții pot vedea un sfârșit al perioadei stresante. Prin urmare, se sugerează că stresul academic este mai asemănător cu stresul acut în ceea ce privește răspunsul la stres. Nivelurile de cortizol din studiul de față au fost în același interval cu ceea ce a fost raportat anterior pentru stresul acut .
Stresul cronic este legat de o secreție crescută susținută de cortizol. Recent s-a dezbătut dacă este vorba de nivelurile reale crescute de cortizol sau mai degrabă de modul în care țesuturile țintă răspund la nivelurile crescute care este cauza multor boli și simptome asociate cu stresul cronic . Ceea ce se știe este că o creștere prelungită a nivelurilor de glucoză din sânge poate duce la irosirea mușchilor, la acumularea și redistribuirea grăsimilor și, eventual, la diabet. Prin urmare, o posibilă țintă pentru probiotice ar putea fi persoanele stresate cronic, la care nivelurile ridicate susținute de cortizol cresc riscul de a dezvolta boli legate de stresul cronic .
Există, în general, diferențe individuale mari în ceea ce privește nivelurile măsurate ale IgA salivare, ceea ce încurcă încercările de a observa diferențe între grupuri mici de persoane. Cu toate acestea, valorile mediane din diferitele grupuri corespund bine cu cele raportate de alții . Rezultatele prezente din probele de salivă integrală au arătat că valorile dintre grupul placebo și grupul de testare nu diferă semnificativ între ele și că valorile mediane în ambele grupuri au fost similare. Privind schimbarea relativă în fiecare grup, valoarea mediană a fost ușor pozitivă pentru grupul probiotic, în timp ce a fost ușor negativă în grupul placebo. Comparând cu percentilele 25 și 75, se observă o creștere a unei părți importante a nivelurilor IgA salivare detectate în grupul placebo, ceea ce face dificilă formularea unor concluzii (figura 2). Factorii de stres care provoacă un stres cronic au fost legați de scăderea nivelurilor de IgA salivare , în timp ce stresul acut s-a dovedit a crește nivelurile , ceea ce indică o activare a răspunsului imunitar. Prin urmare, s-ar putea sugera că factorul de stres din acest studiu este mai probabil să fie acut decât cronic.
Studii anterioare au arătat o tendință care sugerează că probioticele pot crește nivelurile de IgA salivare în timpul stresului . Cu toate acestea, persoanele testate în cadrul prezentului studiu au avut un aport de probiotice doar pe o perioadă de două săptămâni și, chiar dacă a existat un nivel semnificativ mai mare de lactobacili în acest grup, ar putea fi posibil ca perioada de studiu să fi fost prea scurtă pentru a vedea schimbări clare la nivel individual. Având în vedere diferențele individuale mari în ceea ce privește nivelurile IgA salivare, ar fi fost de dorit și un număr mai mare de participanți în fiecare grup.
Nivelurile IgA salivare din saliva glandei minore se constată a fi mai mari decât cele raportate de alții, ceea ce s-ar putea datora diferențelor individuale sau datorită designului studiului din această lucrare. De exemplu, participanților li s-a aplicat un anumit nivel de stres și un anumit tip de stres, ceea ce nu s-a aplicat în studiul realizat de Sonesson et al. . Datele din saliva glandei minore au arătat că valorile mediane au fost mai mari în grupul de testare decât în grupul placebo, dar diferența dintre grupuri nu a fost semnificativă. Creșterea pare a fi mai mare în grupul căruia i s-au administrat probiotice în comparație cu grupul placebo, dar modificarea relativă a valorii mediane este aproximativ aceeași în cele două grupuri. Cu toate acestea, barele de eroare indică variații mari în cadrul grupului căruia i s-au administrat probiotice, ceea ce ar putea explica contradicția (Figura 3).
Se așteaptă ca stresul naturalist scurt, inclusiv stresul academic, să se situeze undeva între stresul acut și stresul cronic în ceea ce privește creșterea sau scăderea markerilor de stres. Deoarece stresorul este greu de definit în ceea ce privește tipul de stres aplicat și deoarece stresul individual aplicat fiecărui participant ar fi putut fi diferit, diferențele nesemnificative găsite sunt în concordanță cu teoria pentru modul în care IgA poate reflecta stresul. Poate că ar fi fost mai ușor de observat modificările IgA salivare dacă perioada de studiu ar fi fost mai lungă sau dacă s-ar fi colectat probe suplimentare la una sau două săptămâni după studiu, deoarece în alte studii s-a observat că nivelurile de IgA scad, de asemenea, la ceva timp după stresul experimentat . O altă explicație ar putea fi faptul că, deși participanților li s-a spus să noteze orice modificare a stării lor de sănătate (de exemplu, incidente de răceală), acest lucru nu a fost nici controlat, nici comparat cu valorile aberante din datele privind IgA salivare. Răcelile și alte infecții respiratorii ar provoca probabil o creștere a IgA salivare, deoarece IgA face parte din prima linie de apărare a sistemului imunitar împotriva agenților patogeni.
A existat o creștere semnificativă a nivelurilor de lactobacili pentru grupul probiotic, de asemenea, în comparație cu grupul placebo, ceea ce arată că bacteriile administrate pot supraviețui în cavitatea bucală (Figura 4). Acest lucru a fost susținut, de asemenea, de rezultatul tipizării RAPD, indicând prezența L. plantarum 299v în probele în care nivelurile de lactobacili au fost peste limita de detecție. Astfel, pare să existe o legătură între prezența crescută a bacteriilor probiotice și scăderea nivelului de cortizol din salivă.
5. Concluzii
Există o diferență semnificativă în răspunsul secreției de cortizol între persoanele testate cărora li s-au administrat probiotice sau placebo, posibil în legătură cu stresul. În plus, s-a observat o creștere semnificativă a nivelului de lactobacili pentru grupul probiotic în comparație cu grupul placebo. În schimb, nu s-a constatat nicio semnificație în cazul IgA salivare.
Interesele concurente
Irini Lazou Ahrén este angajată la Probi AB. Produsul și capsulele placebo au fost furnizate de Probi AB. Nu trebuie raportate alte interese concurente.
Contribuțiile autorilor
Cei doi primii autori, Hannah Andersson și Cecilia Tullberg, au contribuit în mod egal la această lucrare, iar primul autor este partajat.
Recunoștințe
Autorii mulțumesc lui Jie Xu și Marie Kala, Universitatea Lund, pentru ajutorul de laborator..