Plamy immunohistochemiczne

Co to jest immunohistochemia?

Immunohistochemia (IHC) jest uważana za zaawansowaną formę histopatologii. Immunohistochemia nie jest zwykle stosowana początkowo, ale jest dodawana, gdy rutynowe/regularne badania histologiczne są niewystarczające do postawienia diagnozy.

IHC wykorzystuje przeciwciała pierwszorzędowe do znakowania białka, a następnie wykorzystuje przeciwciało drugorzędowe, które jest związane z przeciwciałem pierwszorzędowym. W barwieniu immunoperoksydazowym, przeciwciało jest połączone z enzymem, peroksydazą, która katalizuje reakcję, w której białko jest specyficznie barwione na brązowo. IHC może również obejmować przeciwciało znakowane fluorescencyjnie, tak że podczas oglądania pod mikroskopem świetlnym będzie można zaobserwować pewien wzór z emitowanej fluorescencji.

Wzór IHC jest uważany za diagnostyczny, wykazujący wzory jądrowe, błonowe lub cytoplazmatyczne. IHC jest często stosowane w sytuacjach, w których obecność lub brak pewnych białek może stanowić podstawę do postawienia diagnozy. Może być również wykorzystywana do rozróżnienia dwóch różnych procesów chorobowych, które w przeciwnym razie mogą wydawać się podobne dla patologa.

Jak wykonuje się immunohistochemię?

Najczęstszy proces przygotowywania szkiełek immunohistochemicznych jest następujący:

1. Utrwalenie tkanki (na ogół barwniki IHC utrwala się formaliną)
2. Utrwalenie tkanki (w parafinie)
3. Skrawanie tkanek
4. Odzyskiwanie (wykonywane z zastosowaniem ciepła lub enzymów proteolitycznych)
5. Umontowanie i odwodnienie
6. Oczyszczenie i obserwacja szkiełek.

Jakie są zalety i wady immunohistochemii?

Zalety IHC obejmują:

• Możliwe jest użycie świeżych lub zamrożonych próbek tkanek do IHC.
• IHC jest dobrze ugruntowane i łatwo dostępne.
• Koszt IHC jest stosunkowo niski
• Ma szybki czas realizacji.
• Ponieważ nie są zaangażowane żadne żywe czynniki zakaźne, ryzyko dla zdrowia ludzkiego jest minimalne.

Wady IHC są następujące:

• Barwienia IHC nie są znormalizowane na całym świecie.
• Choć koszt procedury jest stosunkowo niedrogi, sprzęt potrzebny do wykonania IHC jest kosztowny.
• Kwantyfikacja wyników jest trudna.
• IHC podlega błędom ludzkim. Dobrze wyszkolony personel jest najważniejszy.

Jakie są przykłady barwień immunohistochemicznych?

Setki barwień immunohistochemicznych są używane do identyfikacji różnych guzów i innych nowotworów. Poniżej wymieniono tylko kilka barwników IHC stosowanych w dermatologii.

.

IHC Stain	Uses/Image caption
BCL2	Usłuży do rozróżniania raków podstawnokomórkowych i trichoepithelioma
CD3	Marker komórek T; silnie dodatni w ziarniniaku grzybiastym
CD4	Helper T-cell marker
CD8	Suppressor T-marker komórek
CD20	marker komórek B
CD30	Może być stosowany w diagnostyce chłoniaka Hodgkina i chłoniaków anaplastycznych. Duże komórki: Aparat Golgiego i barwienie błoniaste
CD31	Pomaga w identyfikacji guza śródbłonkowego
CD34	Odróżnia różne guzy śródbłonka i jest pozytywna w dermatofibrosarcoma
CD56	Używana w diagnostyce chłoniaków innych niż Hodgkina.chłoniaków Hodgkina, białaczek i raków drobnokomórkowych
CD117	Marker dla receptora KIT i pozytywny w różnych nowotworach, w tym w mastocytozie
CDKN2A (p16)	Marker supresora nowotworów pozytywny w nowotworach związanych z HPV,
CK (różne)	Cytokeratyny mogą być używane do odróżniania łagodnych i złośliwych guzów przydatków
CK 20	Specyficzny dla raka z komórek Merkla. Może pomóc w identyfikacji gruczolakoraków układu pokarmowego i rozrodczego, a także nowotworów nabłonkowych przewodu pokarmowego
Cytokeratyna o wysokiej masie cząsteczkowej	Używana do wykrywania raków przewodowych, raków płaskonabłonkowych i innych nowotworów nabłonkowych
Desmina	Marker mięśniowy
EMA	Używana do identyfikacji nowotworów ekrynowych, choroby Pageta i raków łojowych
Faktor 13	Może pomóc klinicystom odróżnić dermatofibrosarcoma od dermatofibroma
HHHV8	Human herpesvirus 8
HMB 45	Używany do wykrywania melanocytów, szczególnie w czerniaku, ale negatywny w czerniaku desmoplastycznym
Melan-a	Może pomóc w identyfikacji komórek znamienia melanocytowego i czerniaków
PDL1	Programmed death-ligand 1
S-100	Usłuży do oznaczania guzów melanocytów, zarówno naevi jak i melanoma
SMA	Antygen mięśni gładkich
SOX-10	Jądrowy marker dla guzów melanocytowych
Treponema pallidum	Demonstracja organizmów w kile wtórnej

Barwienia immunohistochemiczne

.