Bloodborne Agents
Mycoplasma haemofelis (Mhf), “Candidatus Mycoplasma haemominutum” (Mhm), e “Candidatus M. turicensis” (Mtc) possono tutti essere trovati nei gatti. In gatti infettati sperimentalmente, Mhf è apparentemente più patogeno di Mhm. Sembra che Mtc abbia una patogenicità intermedia. La diagnosi si basa sulla dimostrazione dell’organismo sulla superficie degli eritrociti all’esame di una sottile pellicola di sangue o sul test PCR. Il numero di organismi fluttua e quindi l’esame della pellicola di sangue può essere falsamente negativo fino al 50% delle volte. L’organismo può essere difficile da trovare citologicamente, in particolare nella fase cronica. Pertanto, i test PCR sono i test di scelta a causa della sensibilità.13 Sono disponibili primer che possono amplificare tutte e tre le emoplasie. I test PCR in tempo reale possono essere utilizzati per monitorare il numero di copie durante e dopo il trattamento, ma non hanno una maggiore sensibilità, specificità o valore predittivo rispetto ai test PCR convenzionali.32 I test PCR dovrebbero essere considerati nella valutazione dei gatti con febbre inspiegabile o anemia che sono citologicamente negativi. Inoltre, l’American College of Veterinary Internal Medicine (ACVIM) raccomanda lo screening dei gatti come donatori di sangue tramite test PCR per l’emoplasma.35 Molti gatti (circa il 15%) sono portatori del Candidatus M. haemominutum, relativamente non patogeno, e quindi i risultati positivi del test possono non essere sempre correlati alla presenza della malattia (scarsa PPV).
I gatti possono essere infettati dall’organismo E. canis-like2 e da Anaplasma phagocytophilum.15 Si sa poco degli altri agenti di questi generi per quanto riguarda i gatti. Poiché gli organismi appartengono a generi diversi, la reattività incrociata sierologica è variabile. Quindi, anche se le sindromi cliniche possono essere simili, non esiste un unico test sierologico per documentare l’infezione, e attualmente non esiste una sierologia standardizzata per i gatti. Inoltre, alcuni gatti con infezione da E. canis non si convertono, e quindi il test PCR è superiore alla sierologia nei gatti. I test PCR possono essere progettati per amplificare ogni organismo. In alternativa, sono disponibili primer per amplificare tutti gli organismi in una singola reazione, e poi il sequenziamento può essere utilizzato per determinare la specie infettiva. Tuttavia, i risultati positivi del test non sono sempre correlati alla presenza della malattia. Il DNA di Anaplasma phagocytophilum è stato amplificato dal sangue di gatti sani per più di 10 settimane dopo l’infezione sperimentale mediante esposizione a zecche Ixodes (MR Lappin, dati non pubblicati, 2011).
I gatti possono essere infettati da Rickettsia felis e hanno dimostrato di avere anticorpi contro R. rickettsii. Febbre, mal di testa, mialgia e rash maculare negli esseri umani sono stati attribuiti all’infezione da R. felis in diversi paesi del mondo. In uno studio recente nel nostro laboratorio, abbiamo analizzato 92 coppie di sangue di gatto ed estratti di pulce dall’Alabama, dal Maryland e dal Texas, usando saggi PCR che amplificano una regione del gene della citrato sintasi (gltA) e il gene della proteina B della membrana esterna (ompB). Delle 92 coppie, 62 su 92 (67,4%) estratti di pulce e nessuno dei campioni di sangue di gatto sono risultati positivi al DNA di R. felis.11 In un altro studio, abbiamo dimostrato che i tassi di prevalenza degli anticorpi di R. felis e R. rickettsii nei gatti con febbre erano rispettivamente del 5,6% e del 6,6%, ma nessuno dei due organismi è stato amplificato dal sangue.1 Questi risultati dimostrano che i gatti sono talvolta esposti, ma sono necessari ulteriori dati per determinare il significato delle associazioni di malattia. Se i test PCR di Rickettsia spp. siano indicati per l’uso nei gatti in questo momento non è noto.
La coltura del sangue, il test PCR sul sangue e i test sierologici possono essere utilizzati per valutare i singoli gatti per l’infezione da Bartonella spp.3 I gatti che sono negativi alla coltura o negativi alla PCR e negativi agli anticorpi, e i gatti che sono negativi alla coltura o negativi alla PCR e positivi agli anticorpi, probabilmente non sono una fonte di infezione da pulci, gatto o uomo. Tuttavia, la batteriemia può essere intermittente e possono verificarsi risultati di coltura o PCR falsi negativi, limitando il valore predittivo di una singola batteria di test.17 Anche se i test sierologici possono essere utilizzati per determinare se un singolo gatto è stato esposto, sia i gatti sieropositivi che quelli sieronegativi possono essere batteremici, limitando l’utilità diagnostica dei test sierologici. Pertanto, testare i gatti sani per l’infezione da Bartonella non è attualmente raccomandato.3,14 Il test dovrebbe essere riservato ai gatti con sospetta bartonellosi clinica. Poiché l’infezione da Bartonella spp. è così comune nei gatti sani, anche risultati positivi alla coltura o alla PCR non provano la bartonellosi clinica. Per esempio, anche se abbiamo rilevato il DNA di Bartonella spp. in più gatti con febbre che in gatti appaiati senza febbre, i gatti sani erano ancora comunemente positivi.16 La sierologia combinata con la PCR nella valutazione dei gatti con sospetta bartonellosi è probabile che dia il miglior valore predittivo.
Cytauxzoon felis è di solito facilmente identificabile all’esame citologico di strisci di sangue o aspirati splenici durante la valutazione dei gatti clinicamente malati. I test sierologici non sono disponibili in commercio al momento. La PCR può essere usata per amplificare il DNA dell’organismo dal sangue di gatti che sono citologicamente negativi.9
Gli anticorpi contro il virus dell’immunodeficienza felina (FIV) sono rilevati nel siero nella pratica clinica più frequentemente tramite il test di immunosorbimento enzimatico (ELISA). Confronti tra diversi test hanno mostrato che i risultati della maggior parte dei test sono comparabili.10 I risultati dell’isolamento del virus o della RT-PCR sul sangue sono positivi in alcuni gatti anticorpo-negativi. Reazioni falso-positive possono verificarsi usando l’ELISA; quindi, i risultati positivi dell’ELISA in gatti sani o a basso rischio dovrebbero essere confermati usando l’immunodosaggio Western blot. I gattini possono avere anticorpi rilevabili derivati dal colostro per diversi mesi. Se gli anticorpi persistono a 6 mesi di età, il gattino è probabilmente infetto. L’isolamento del virus o la RT-PCR sul sangue possono anche essere eseguiti per confermare l’infezione. Tuttavia, il FIV non è presente nel sangue ad alti livelli, e quindi i risultati falso-negativi sono comuni. Inoltre, ci sono risultati variabili tra i laboratori.6
La maggior parte dei gatti con infezione da virus della leucemia felina sono viremici, e quindi, i test diagnostici molecolari non sono solitamente necessari nella pratica clinica. Tuttavia, l’uso di nuovi e sensibili test PCR in tempo reale è stato usato per caratterizzare accuratamente gli stadi dell’infezione.19 Tuttavia, questi test non sono comunemente disponibili in commercio.
L’RNA di entrambi FIPV e FECV può essere amplificato dal sangue dei gatti, e così, i risultati positivi del test non sono sempre correlati allo sviluppo della FIP. L’amplificazione dell’mRNA del gene M tramite RT-PCR ha avuto risultati contrastanti in due studi effettuati fino ad oggi. In uno studio, 13 di 26 gatti apparentemente normali erano positivi per l’mRNA di FECV nel sangue, suggerendo che il valore predittivo positivo di questo test per la diagnosi di FIP era basso.5