Struttura chimica di HEPES = N-(2-idrossietil)
piperazina-N’-
(acido 2-etanesolfonico)

HEPES è una comune sostanza chimica tampone simile al Tris nei tamponi Tris-HCl e ai fosfati nel PBS. I tamponi sono usati per mantenere il pH ad un certo valore e possono “tamponare” l’aggiunta di piccole quantità di acidi/basi.

Proprietà di HEPES

Php stabile rispetto alla temperatura, nessun gruppo amminico primario, nessuna chelazione dei metalli, vicino all’intervallo di pH fisiologico. HEPES è spesso usato per mantenere la solubilità delle proteine negli esperimenti biochimici.

  • pKa a 25C di 7,55 (7,31 a 37C); (il 2° pKa a pH 3 non è di interesse)
  • intervallo di tamponamento utilizzabile di 6.8 a 8,2
  • peso molecolare 238,3 g/mol
  • ΔpKa/ΔT = -,014
  • HEPES contiene ammine terziarie, che sono reattive in determinate condizioni.
  • Formula chimica: C8H18N2O4S; N-(2-idrossietil)-piperazina-N’-(acido 2-etanesulfonico); alias acido 4-(2-idrossietil)-1-piperazinaetanesulfonico; numero CAS: 7365-45-9

I tamponi sono tipicamente 1 M, preparati neutralizzando HEPES con idrossido di sodio. HEPES è essenzialmente insolubile finché non viene neutralizzato.

Buffer 1M HEPES KOH 7.5

  • 700 ml di acqua ultrapura
  • 238.3 g di pellet HEPES
  • KOH (idrossido di potassio) per regolare il pH a 7,5
  • a 1L w di acqua ultrapura; sterilizzare per filtrazione

1M HEPES-NaOH pH 7.5

  • 700 ml di acqua ultrapura
  • 238,3 g di HEPES
  • ~5,5 g di NaOH (idrossido di sodio) in pastiglie per regolare il pH a 7,5
  • a 1L di acqua ultrapura; sterilizzare per filtrazione

Links

  • pubblicazioni originali: Good’66 PMID 5942950, Good’74 PMID 4206745, Blanchard’84 PMID 6717292
  • Wikipedia: soluzione tampone
  • CP: tamponi comuni
  • Lista di tamponi comuni dallo Smith College

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