Struttura chimica di HEPES = N-(2-idrossietil)
piperazina-N’-
(acido 2-etanesolfonico)
piperazina-N’-
(acido 2-etanesolfonico)
HEPES è una comune sostanza chimica tampone simile al Tris nei tamponi Tris-HCl e ai fosfati nel PBS. I tamponi sono usati per mantenere il pH ad un certo valore e possono “tamponare” l’aggiunta di piccole quantità di acidi/basi.
Proprietà di HEPES
Php stabile rispetto alla temperatura, nessun gruppo amminico primario, nessuna chelazione dei metalli, vicino all’intervallo di pH fisiologico. HEPES è spesso usato per mantenere la solubilità delle proteine negli esperimenti biochimici.
- pKa a 25C di 7,55 (7,31 a 37C); (il 2° pKa a pH 3 non è di interesse)
- intervallo di tamponamento utilizzabile di 6.8 a 8,2
- peso molecolare 238,3 g/mol
- ΔpKa/ΔT = -,014
- HEPES contiene ammine terziarie, che sono reattive in determinate condizioni.
- Formula chimica: C8H18N2O4S; N-(2-idrossietil)-piperazina-N’-(acido 2-etanesulfonico); alias acido 4-(2-idrossietil)-1-piperazinaetanesulfonico; numero CAS: 7365-45-9
I tamponi sono tipicamente 1 M, preparati neutralizzando HEPES con idrossido di sodio. HEPES è essenzialmente insolubile finché non viene neutralizzato.
Buffer 1M HEPES KOH 7.5
- 700 ml di acqua ultrapura
- 238.3 g di pellet HEPES
- KOH (idrossido di potassio) per regolare il pH a 7,5
- a 1L w di acqua ultrapura; sterilizzare per filtrazione
1M HEPES-NaOH pH 7.5
- 700 ml di acqua ultrapura
- 238,3 g di HEPES
- ~5,5 g di NaOH (idrossido di sodio) in pastiglie per regolare il pH a 7,5
- a 1L di acqua ultrapura; sterilizzare per filtrazione
Links
- pubblicazioni originali: Good’66 PMID 5942950, Good’74 PMID 4206745, Blanchard’84 PMID 6717292
- Wikipedia: soluzione tampone
- CP: tamponi comuni
- Lista di tamponi comuni dallo Smith College