Spiegare cosa sta succedendo
Questo presuppone che tu abbia letto la spiegazione di cosa succede durante la cromatografia su strato sottile. Se non l’hai fatto, segui il primo link all’inizio della pagina e torna a questo punto in seguito.
Il composto blu è ovviamente più polare di quello giallo – forse ha anche la capacità di legarsi a idrogeno. Puoi dirlo perché il composto blu non viaggia attraverso la colonna molto velocemente. Ciò significa che deve adsorbire più fortemente il gel di silice o l’allumina rispetto a quello giallo. Quello giallo, meno polare, passa più tempo nel solvente e quindi si lava attraverso la colonna molto più velocemente.
Il processo di lavaggio di un composto attraverso una colonna usando un solvente è noto come eluizione. Il solvente è talvolta conosciuto come eluente.
E se vuoi raccogliere anche il composto blu?
Ci vorranno secoli per lavare il composto blu alla velocità a cui sta viaggiando in questo momento! Comunque, non c’è motivo per cui non puoi cambiare il solvente durante l’eluizione.
Supponiamo che tu sostituisca il solvente che hai usato con un solvente più polare una volta che il giallo è stato raccolto tutto. Questo avrà due effetti, entrambi i quali accelereranno il composto blu attraverso la colonna.
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Il solvente polare competerà per lo spazio sul gel di silice o sull’allumina con il composto blu. Qualsiasi spazio temporaneamente occupato da molecole di solvente sulla superficie della fase stazionaria non è disponibile per le molecole blu per attaccarsi e questo tenderà a farle muovere nel solvente.
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Ci sarà una maggiore attrazione tra le molecole di solvente polare e le molecole blu polari. Questo tenderà ad attrarre le molecole blu che si attaccano alla fase stazionaria di nuovo in soluzione.
L’effetto netto è che con un solvente più polare, il composto blu passa più tempo in soluzione, e quindi si muove più velocemente.
Perché allora non usare questo solvente alternativo? La risposta è che se entrambi i composti nella miscela viaggiano velocemente attraverso la colonna fin dall’inizio, probabilmente non otterrai una separazione così buona.
E se tutto nella tua miscela è incolore?
Se tu dovessi usare la cromatografia su colonna per purificare il prodotto di una preparazione organica, è molto probabile che il prodotto che vuoi sia incolore anche se una o più impurità sono colorate. Supponiamo il caso peggiore che tutto sia incolore.
Come fai a sapere quando la sostanza che vuoi ha raggiunto il fondo della colonna?
Non esiste un modo semplice e veloce per farlo! Quello che fai è raccogliere ciò che esce dal fondo della colonna in tutta una serie di provette etichettate. La dimensione di ogni campione dipenderà ovviamente da quanto è grande la colonna – potresti raccogliere campioni di 1 cm3 o di 5 cm3 o qualsiasi cosa sia appropriata.
Puoi poi prendere una goccia da ogni soluzione e farne un cromatogramma a strato sottile. Metteresti la goccia sulla linea di base accanto a una goccia da un campione puro del composto che stai facendo. Facendo questo ripetutamente, puoi identificare quale dei tuoi campioni raccolti sul fondo della colonna contiene il prodotto desiderato, e solo il prodotto desiderato.
Una volta che sai questo, puoi combinare tutti i campioni che contengono il tuo prodotto puro, e poi rimuovere il solvente. (Come si separa il solvente dal prodotto non è direttamente pertinente a questo argomento e varia a seconda della loro esatta natura – quindi non tenterò nemmeno una generalizzazione).