Abstract

Objectif. Clarifier l’effet de Lactobacillus plantarum 299v sur les niveaux de cortisol salivaire et d’IgA salivaire chez les jeunes adultes soumis à un stress lié à un examen. Conception. Quarante et un étudiants ayant un examen académique à venir ont été inclus dans une étude randomisée en double aveugle, contrôlée par placebo. Les bactéries probiotiques ou le produit placebo ont été administrés en capsules une fois par jour pendant 14 jours. La salive a été prélevée et un test de stress perçu a été rempli à chaque prélèvement. La salive a été recueillie pour l’analyse du cortisol par dosage immunologique par électrochimioluminescence (ECLI) et les IgA salivaires ont été analysées par dosage immunologique lié à l’enzyme (ELISA). L’abondance des lactobacilles a été évaluée par la culture de la salive sur un milieu sélectif et l’identification de L. plantarum 299v a été effectuée sur des colonies sélectionnées au hasard par une amplification aléatoire de l’ADN polymorphe (RAPD). Résultats. Une différence significative des niveaux de cortisol a été trouvée entre le groupe de traitement et le groupe placebo (), ainsi qu’une augmentation significative des niveaux de lactobacilles dans le groupe de traitement par rapport au groupe placebo (). Aucun changement significatif n’a été trouvé pour les IgA salivaires. Conclusion. Une bactérie probiotique ayant la capacité de réduire les symptômes du syndrome de l’intestin irritable (SII) a interdit l’augmentation des niveaux du marqueur de stress qu’est le cortisol pendant la période d’examen. Le numéro d’enregistrement de l’étude est NCT02974894, et l’étude est enregistrée sur ClinicalTrials.gov.

1. Introduction

Il existe un lien entre le tube digestif et le stress physiologique et le cortisol salivaire et l’immunoglobuline A salivaire (IgA salivaire) peuvent être pris comme marqueurs du stress . Le cortisol est une hormone stéroïde libérée par les glandes surrénales en réponse au stress et l’augmentation de son taux est liée à la suppression du système immunitaire. L’IgA salivaire fait partie de la défense immunitaire orale et constitue l’anticorps le plus abondant dans la salive, principalement sous forme d’IgA sécrétoire. Les glandes salivaires mineures, positionnées tout au long de la muqueuse buccale, sécrètent environ 30-35% de toutes les IgA salivaires qui se produisent dans la salive entière adulte .

Les probiotiques sont définis comme « des micro-organismes vivants qui, lorsqu’ils sont administrés en quantités adéquates, confèrent un avantage pour la santé de l’hôte » . L. plantarum 299v a, dans des études antérieures, montré un effet positif sur les symptômes du syndrome du côlon irritable (SCI), tels que les ballonnements et les douleurs . Il a également été démontré que cette souche s’oppose aux fuites intestinales, ce qui pourrait atténuer la réponse de l’axe hypothalamo-hypophyso-surrénalien (HHS) au stress. Aucune étude antérieure n’a été menée sur l’effet de L. plantarum 299v sur les conditions liées au stress. Cependant, il a été montré chez des ratons stressés par la séparation de leur mère qu’un mélange probiotique de Lactobacillus rhamnosus R0011 et Lactobacillus helveticus R0052 diminuait significativement les niveaux de corticostérone, l’analogue du cortisol dans le sang des animaux . De même, les rats soumis à un facteur de stress aigu limité dans le temps sont devenus moins stressés après un traitement avec Lactobacillus farciminis , ainsi qu’une diminution des niveaux de lipopolysaccharides (LPS) dans le sang .

On sait peu de choses sur les effets des bactéries probiotiques sur les marqueurs de stress dans la salive, malgré le fait que le prélèvement de salive est une méthode facile et non invasive qui ne cause aucun dommage ou inconfort à la personne testée. Ceci est particulièrement important lors de l’évaluation des marqueurs de stress où une augmentation aiguë pourrait être due à la méthode d’échantillonnage et non au facteur de stress aigu évalué dans l’étude. En ce qui concerne les effets des probiotiques sur les niveaux d’IgA salivaires, la plupart des études sont liées à l’incidence de diverses infections respiratoires et, dans une étude précédente, il a été signalé que les niveaux d’IgA sécrétoires dans les selles augmentaient dans un groupe d’enfants recevant un produit contenant L. rhamnosus HN001 par rapport à un groupe placebo. Des résultats similaires ont été obtenus avec la souche L. rhamnosus GG .

Le stress chronique est lié à l’augmentation des niveaux de cortisol, mais la question de savoir si le cortisol est un agent causal des réactions physiologiques de stress ou simplement une conséquence de celles-ci est ouverte à la discussion . La libération de cortisol est une réponse périphérique retardée à un stress aigu et il est suggéré que le cortisol exerce des actions à la fois stimulantes et suppressives sur la réponse de l’organisme au stress. Un exemple d’action stimulante est le déclenchement de l’activation cardiovasculaire ; cependant, en réponse à un facteur de stress, par exemple une hémorragie, le cortisol supprime la réponse de diminution du volume de liquide en inhibant la sécrétion rapide initiale d’hormones de stress vasoconstrictives. En ce qui concerne les propriétés de régulation immunitaire du cortisol, il est suggéré que sa sécrétion protège contre le « dépassement » de la réponse immunitaire qui se produit normalement en réponse au stress. Cependant, il n’est pas encore clair quels buts l’augmentation du niveau de cortisol sert pendant la réponse du corps au stress .

Dans la présente étude, l’objectif principal était de clarifier l’effet de la bactérie probiotique Lactobacillus plantarum 299v sur le niveau de cortisol salivaire chez les jeunes adultes sous stress d’examen. Les IgA salivaires des glandes mineures et de la salive humaine entière ont été mesurées comme marqueurs alternatifs du stress. L’hypothèse était que les niveaux de cortisol seraient réduits ou stabilisés dans le groupe test, par rapport au groupe placebo où les niveaux de cortisol étaient censés augmenter en raison du stress induit par l’examen. En revanche, on s’attendait à ce que les niveaux d’IgA salivaires augmentent dans le groupe test par rapport au groupe placebo.

2. Matériel et méthodes

2.1. Conception de l’étude

Dans le présent essai randomisé, en double aveugle et contrôlé par placebo, des étudiants volontaires de l’Université de Lund, âgés de 18 à 30 ans, ont participé pendant leur période d’examen. Les critères d’exclusion étaient la grossesse ainsi que la prise d’antibiotiques et de médicaments temporaires à base de cortisone pendant la période d’étude. Un calcul de puissance a été effectué afin de décider du nombre de sujets et 40 individus ont été considérés comme suffisants. 42 jeunes adultes en bonne santé se sont portés volontaires pour l’étude, 28 femmes et 14 hommes, et tous les participants ont donné leur consentement éclairé signé pour l’étude. Après l’abandon d’un homme, 41 personnes ont terminé l’ensemble de la période expérimentale. 21 ont reçu le produit testé à une dose quotidienne de 1 1010 unités formatrices de colonies de L. plantarum 299v en gélules (L. plantarum 299v, fécule de pomme de terre, hydroxypropylméthylcellulose et stéarate de magnésium, (Probi AB, Lund, Suède)) et 20 ont reçu des gélules placebo, contenant les mêmes ingrédients que le produit testé à l’exception des bactéries. Avant le début de la période expérimentale, les participants ont bénéficié d’une période d’élimination de deux semaines au cours de laquelle il leur a été demandé d’éviter de consommer des produits probiotiques. La capsule a ensuite été prise une fois par jour après le déjeuner et les sujets ont été invités à ne pas manger, boire, fumer ou prendre du tabac à priser pendant une heure après la prise. Les participants ont également reçu l’instruction de mâcher la gélule jusqu’à ce que la poudre soit dissoute dans la bouche (30 secondes minimum) ou de vider la gélule sur une cuillère et de mâcher la poudre pendant 30 secondes avant de l’ingérer. Les échantillons de référence de tous les participants ont été prélevés le jour 0, avant toute prise du produit. L’étude s’est poursuivie pendant 14 jours et la date de début a été décidée individuellement pour tous les participants, dans un délai de 1,5 semaine.

2.2. Évaluation psychologique

Une évaluation psychologique a été incluse afin que les sujets du test puissent évaluer leur stress auto-perçu. Un questionnaire de 30 questions développé par Levenstein et al. a été utilisé et le score le plus bas obtenu indique un degré de stress plus faible et vice versa. Un indice donnant un nombre entre 0 et 1 a été calculé en utilisant la méthode suivante :

2.3. Prélèvement de salive

La salive des glandes mineures a été prélevée sur les zones de la muqueuse labiale inférieure comme décrit précédemment et la salive entière a été récoltée le même jour de prélèvement. Pour réduire l’influence des variations circadiennes de la sécrétion salivaire pendant la collecte, tous les prélèvements ont été effectués entre 15 et 17 heures. Tous les échantillons ont été prélevés le jour 0 et le jour 14 et, les jours 5 et 10, seuls les échantillons de cortisol ont été prélevés. Les participants avaient pour consigne de ne pas manger, boire, prendre du tabac à priser, fumer, se brosser les dents ou faire un quelconque exercice une heure avant l’heure du prélèvement. L’alcool était également interdit douze heures avant le rendez-vous de prélèvement des échantillons.

2.4. Analyse du cortisol

Le prélèvement de salive pour l’analyse du cortisol a été réalisé avec une Salivette® pour cortisol (Sarstedt, Allemagne) et il a été effectué après le prélèvement de salive pour l’analyse des IgA. Les participants ont reçu pour instruction de faire circuler la salivette dans la bouche pendant 2 à 5 minutes, jusqu’à ce qu’elle soit remplie de salive, puis de la recracher soigneusement dans le tube. Les tubes ont été mis sur de la glace et ensuite congelés à -20°C jusqu’à l’analyse. L’analyse du cortisol a été effectuée par Labmedicin Skåne (les laboratoires universitaires et régionaux de la région de Skåne, en Suède) et a été réalisée conformément à l’accréditation. La méthode utilisée était un test de compétition en une étape avec la technique de détection Immunoessai par électrochimioluminescence (ECLI) basé sur un dérivé du ruthénium (Ru) .

2.5. Analyse des IgA salivaires

La salive des glandes mineures a été recueillie sur la lèvre inférieure à l’aide d’une bandelette SialoPaper® (Oraflow Inc., New York, USA) et placée délicatement sur la muqueuse pendant 60 s et le volume salivaire dans la bandelette a été mesuré par un Periotron® 8000 (Oraflow Inc., New York, USA). La bandelette SialoPaper a été placée dans 1 mL de PBS (1,5 mL PP, Sarstedt, Allemagne ; Phosphate Buffered Saline, Dulbecco A, Oxoid, Angleterre) sur de la glace et conservée à -80°C jusqu’à l’analyse. La salive entière non stimulée a été recueillie après le prélèvement de la salive de la glande mineure. Les participants se sont assis, légèrement penchés en avant, et ont laissé la salive s’écouler dans un micro tube de 2 mL à l’aide d’une paille stérile (pipettes stériles jetables de 1 mL, Kemikalia, Suède ; PP de 2 mL, Sarstedt, Allemagne). Tous les échantillons ont été conservés à -80°C jusqu’à l’analyse.

La concentration d’IgA sécrétée dans la salive est relative à la quantité totale de protéines et donc l’unité % IgA/protéines totales est choisie pour représenter le résultat de l’analyse de la salive entière. Ceci est pertinent puisque la sécrétion d’IgA change avec le débit salivaire, qui à son tour change avec les stimuli sur le système nerveux autonome, par exemple, le stress aigu, le stress chronique et le repos. Ce changement de débit est pris en compte en mesurant le % d’IgA/protéines totales dans la salive, ce qui en fait une méthode précise lors de la comparaison des données de différents sujets de test .

Afin d’analyser la concentration d’IgA salivaire, un sandwich-ELISA modifié a été réalisé selon Krzywkowski et al , en utilisant des IgA anti-humaines de chèvre spécifiques des chaînes α1- et α2 (5 μg/mL, Sigma I0884 ; Sigma Chemical Co, Louis, MO, USA) conjugué à la phosphatase alcaline (Sigma A9669 ; dilué 1 : 30 000 dans du PBST). La concentration de protéines totales a été analysée par un test protéique à démarrage rapide (BIO-RAD) .

Les IgA salivaires dans la salive de la glande mineure ont été exprimées en mg/100 mL. L’analyse des IgA salivaires a été réalisée à la faculté d’odontologie de l’université de Malmö (Malmö, Suède).

2.6. Comptage des plaques de lactobacilles

Pour analyser les lactobacilles oraux, les sujets testés ont mâché une pastille de paraffine (Orion Diagnostics) pour stimuler la sécrétion de salive, et le recueil a été effectué de la même manière que pour les IgA salivaires dans la salive entière. La collecte de cet échantillon de salive a été faite à la fin de chaque prélèvement, car cette méthode de prélèvement donne une salive fortement stimulée, contrairement aux autres méthodes. Les tubes ont été mis sur la glace et 0,25 ml de l’échantillon de salive a été transféré dans un autre micro tube stérile (1,5 ml PP, Sarstedt, Allemagne) qui contenait 0,5 ml de milieu de congélation. Les deux tubes ont été conservés à -80°C jusqu’à l’analyse.

L’abondance des lactobacilles a été évaluée par comptage sur plaque. Les échantillons ont été dilués et étalés sur des plaques de gélose Rogosa (Oxoid, Angleterre) et les plaques ont été incubées à 37°C pendant 72 heures en conditions anaérobies (2,5 L, AnaeroGen™, Oxoid). Deux colonies de chaque plaque ont été prélevées au hasard et remises en culture. Les isolats ont été congelés et conservés dans des milieux de congélation à -80°C.

2.7. Identification de L. plantarum 299v

Pour l’extraction de l’ADN de chaque isolat, les échantillons ont été décongelés et passés au vortex peu de temps avant l’ajout de 1 ml d’eau MilliQ stérile et la centrifugation à vitesse maximale (14 800 g, 1 min). Le surnageant a été retiré et un autre 0,25 ml d’eau MilliQ stérile a été ajouté. Le reste de l’extrait cellulaire a été finement broyé avec des billes de verre Assistent® stériles (Ø 2 mm, Glaswarenfabrik Karl Hecht, Allemagne) dans un agitateur (6°C, 30 min) et tous les échantillons ont ensuite été utilisés dans une réaction d’amplification aléatoire de l’ADN polymorphe (RAPD), pour étudier la présence de L. plantarum 299v. Un mélange maître pour 35 échantillons comprenant 175 μL de tampon (Qiagen, Allemagne), 35 μL de dNTP (Roche Diagnostics, Allemagne), 35 μL d’amorce 73 (Qiagen, Allemagne) et 8,75 μL de Taq-Polymérase (Qiagen, Allemagne) a été préparé. 7,25 μL du mastermix ont été ajoutés à chaque tube PCR (Gene Amp 0,5 mL, Applied Biosystems, Singapour) ainsi que 42,75 μL d’H2O et 1 μL du surnageant des échantillons.

La réaction RAPD a été réalisée dans une machine PCR (Perkin Elmer, DNA Thermal Cycler, USA) conformément à Quednau et al . Les gels pour l’électrophorèse sur gel ont été préparés en ajoutant 0,75 g d’Agarose DNA Grade Electran® (VWR, Belgique) dans 50 ml de tampon TB ; puis la solution a été chauffée jusqu’à ébullition et versée dans des réservoirs à gel pour refroidir. Les gels ont enfin été placés dans des bacs à gel avec du tampon TB. 2-5 μL de chaque échantillon ont été ajoutés dans chaque puits ainsi que 3 μL de tampon de chargement avant de réaliser l’électrophorèse (100 V, 1 h). Gel Redx3 (Biotium Inc., USA), 1 mL dans 99 mL de dH2O, a été utilisé pendant 20 min pour colorer les gels et les photos ont été prises selon Quednau et al. .

2.8. Calculs statistiques

Les données ont été évaluées statistiquement en utilisant une analyse de variance (ANOVA) à une voie de Kruskal-Wallis sur les rangs ou un test de somme de rangs de Mann-Whitney lorsque cela était approprié. Le test A a été utilisé pour la comparaison par paire des concentrations absolues d’IgA ainsi que des niveaux absolus de cortisol. Les outils statistiques utilisés étaient Sigma Plot (11.0 et 12.0) et Excel 2013. De plus, un test d’incidence concernant la présence de L. plantarum 299v a été réalisé avec le test exact de Fisher, en utilisant QuickStat (2.6). Les données ont été présentées sous forme de médiane et d’écart interquartile, ainsi que de moyenne et d’écart type. Les valeurs minimales et maximales des échantillons de cortisol ont été supprimées pour éliminer l’impact des valeurs aberrantes, car une déviation claire pouvait être observée dans les données. Cela ne concernait que les échantillons de cortisol. Les valeurs appartenant aux participants qui ne remplissaient pas toutes les conditions de l’étude ont été contrôlées et n’ont pas présenté de déviation. Leurs résultats ont donc été inclus.

2.9. Autorisation éthique

L’étude a été approuvée par le comité régional d’examen éthique de Lund (Ref 2013/166) et les considérations éthiques comprenaient les avantages et les risques avec le produit utilisé et la possibilité de relations personnelles déjà existantes entre le personnel de test responsable et les sujets de test menant l’étude.

3. Résultats

3.1. Évaluation de l’évaluation psychologique

L’évaluation psychologique n’a montré aucune différence significative de stress perçu entre les groupes, et il n’y avait en outre aucune différence significative au sein de chaque groupe en comparant les différents jours d’échantillonnage.

3.2. Taux de cortisol dans la salive

Les taux absolus de cortisol (nM) le jour de référence (jour 0) étaient de 9,18 (±2,50) pour le groupe placebo et de 9,47 (±2,96) pour le groupe test, sans différence significative entre les deux groupes (). Lorsque le changement relatif des niveaux médians de cortisol a été comparé à une valeur de référence au jour 0 (ligne de base), une différence significative a été trouvée entre les groupes au jour 10 ( ; Figure 1). Aucune signification n’a été trouvée au sein des groupes.

Figure 1
La différence des valeurs médianes de cortisol (nM) par rapport aux valeurs de référence (jour 0). L’astérisque () dénote une différence significative () par rapport au groupe placebo au jour 10.

3.3. Concentrations d’IgA dans la salive

Les taux absolus d’IgA (mg/100 ml) dans la salive de la glande mineure le jour de référence (jour 0) étaient de 1,99 (±3,76) pour le groupe placebo et de 4,80 (±9,17) pour le groupe test, sans différence significative entre les deux groupes (). Les taux absolus d’IgA (% IgA/protéines totales) dans la salive entière au jour de référence (jour 0) étaient de 25,3 (±7,37) pour le groupe placebo et de 27,1 (±12,2) pour le groupe test, sans différence significative entre les deux groupes (). Contrairement à la modification des niveaux de cortisol, les concentrations médianes d’IgA salivaires dans la salive entière ou la salive des glandes mineures n’ont pas été affectées par la consommation de probiotiques ; c’est-à-dire qu’aucune différence significative n’a été montrée entre le groupe probiotique et le groupe placebo (figures 2 et 3, respectivement.).

Figure 2
Le changement relatif des valeurs médianes de la salive entière en % d’IgA/concentration totale de protéines (jour 14-jour 0) et les 25ème et 75ème percentiles (encadré) ainsi que les 10ème et 90ème percentiles (barres d’erreur). Les points indiquent les valeurs aberrantes. Toutes les données sont incluses.
Figure 3
Changement relatif de l’échantillon médian d’IgA de la glande mineure, indiqué en mg/100 mL, en comparant le jour 0 au jour 14. Le cadre indique les 25ème et 75ème percentiles et les barres d’erreur les 10ème et 90ème percentiles. Les points indiquent les valeurs aberrantes. Toutes les données sont incluses.

3.4. Comptage viable des lactobacilles et identification de L. plantarum 299v

Au jour 14, on a constaté une augmentation significative de l’abondance des lactobacilles dans la salive des sujets testés consommant des probiotiques par rapport à ceux ayant reçu le produit placebo (). L’augmentation était également significative () au sein du groupe probiotique lorsque l’on compare le jour de référence au jour de l’échantillonnage final (, Figure 4). L’incidence des isolats identifiés comme L. plantarum 299v était significativement augmentée au jour 14 chez les personnes ayant des niveaux détectables de lactobacilles, à la fois par rapport au groupe placebo et à la ligne de base ().

Figure 4
Abondance des lactobacilles en log(cfu/mL) montrant les valeurs médianes. Les astérisques () dénotent une différence significative () par rapport au groupe placebo au jour 14 et au groupe test au jour 0.

4. Discussion

La plupart des participants ont passé leur examen avant la fin de l’étude, ce qui entraîne un pic apparent, mais non significatif (), de stress perçu au jour 10 pour le groupe placebo. Cela coïncide avec le pic de la concentration de cortisol salivaire dans le groupe placebo au jour 10 (figure 1). En revanche, aucun pic n’a été observé dans le groupe probiotique, ce qui suggère que la consommation de probiotiques a eu un effet sur le stress perçu comme la sécrétion de cortisol par les surrénales. Au 14ème jour, de nombreux volontaires avaient terminé leurs examens et on pouvait donc s’attendre à une diminution du cortisol, puisque celui-ci répond relativement rapidement aux facteurs de stress aigus.

Le stress académique, ici sous la forme d’une période d’examens, ne peut être considéré comme un stress chronique, puisque les participants peuvent voir une fin de la période stressante. Il est donc suggéré que le stress académique s’apparente davantage à un stress aigu en ce qui concerne la réponse au stress. Les niveaux de cortisol de la présente étude se situaient dans la même fourchette que ce qui a été précédemment rapporté pour le stress aigu.

Le stress chronique est lié à une augmentation soutenue de la sécrétion de cortisol. La question de savoir si c’est l’augmentation réelle des niveaux de cortisol ou plutôt la façon dont les tissus cibles répondent à cette augmentation qui est à l’origine de nombreuses maladies et symptômes associés au stress chronique fait l’objet d’un débat récent. Ce que l’on sait, c’est qu’une augmentation prolongée de la glycémie peut entraîner une fonte musculaire, une accumulation et une redistribution des graisses et éventuellement un diabète. Par conséquent, une cible possible pour les probiotiques pourrait être les individus stressés chroniques, où les niveaux élevés soutenus de cortisol augmentent leur risque de développer des maladies liées au stress chronique .

Il existe généralement de grandes différences individuelles dans les niveaux mesurés d’IgA salivaire, ce qui brouille les tentatives de voir les différences entre les petits groupes d’individus. Cependant, les valeurs médianes dans les différents groupes correspondent bien à celles rapportées par d’autres . Les résultats actuels des échantillons de salive entière ont montré que les valeurs entre le groupe placebo et le groupe test ne différaient pas significativement les unes des autres et que les valeurs médianes dans les deux groupes étaient similaires. En examinant le changement relatif dans chaque groupe, la valeur médiane était légèrement positive pour le groupe probiotique, alors qu’elle était légèrement négative dans le groupe placebo. Si l’on compare avec les 25e et 75e percentiles, une augmentation d’une grande partie des taux d’IgA salivaires détectés est observée dans le groupe placebo, ce qui rend difficile de tirer des conclusions (figure 2). Les facteurs de stress chroniques ont été associés à une diminution des taux d’IgA salivaires, tandis que le stress aigu a augmenté ces taux, ce qui indique une activation de la réponse immunitaire. Il pourrait donc être suggéré que le facteur de stress dans cette étude est plus susceptible d’être aigu que chronique.

Des études antérieures ont montré une tendance suggérant que les probiotiques peuvent augmenter les niveaux d’IgA salivaires pendant le stress . Cependant, les personnes testées dans la présente étude n’ont pris des probiotiques que pendant une période de deux semaines, et même si le niveau de lactobacilles était significativement plus élevé dans ce groupe, il est possible que la période d’étude ait été trop courte pour observer des changements clairs au niveau individuel. En raison des grandes différences individuelles dans les niveaux d’IgA salivaires, un nombre accru de participants dans chaque groupe aurait également été souhaitable.

Les niveaux d’IgA salivaires dans la salive de la glande mineure s’avèrent plus élevés que ceux rapportés par d’autres, ce qui pourrait être dû à des différences individuelles ou à la conception de l’étude de ce travail. Par exemple, un certain niveau de stress et un certain type de stress ont été appliqués aux participants, ce qui n’était pas le cas dans l’étude de Sonesson et al. Les données de la salive de la glande mineure ont montré que les valeurs médianes étaient plus élevées dans le groupe test que dans le groupe placebo, mais la différence entre les groupes n’était pas significative. L’augmentation semble être plus importante dans le groupe ayant reçu des probiotiques par rapport au groupe placebo, mais le changement relatif de la valeur médiane est approximativement le même dans les deux groupes. Cependant, les barres d’erreur indiquent de grandes variations au sein du groupe ayant reçu des probiotiques, ce qui pourrait expliquer la contradiction (figure 3).

Le stress naturaliste bref, y compris le stress scolaire, devrait se situer quelque part entre le stress aigu et le stress chronique en ce qui concerne l’augmentation ou la diminution des marqueurs de stress. Étant donné que le facteur de stress est difficile à définir en ce qui concerne le type de stress appliqué et que le stress individuel appliqué à chaque participant aurait pu être différent, les différences non significatives trouvées sont conformes à la théorie de la façon dont l’IgA peut refléter le stress. Il aurait peut-être été plus facile d’observer les changements dans les IgA salivaires si la période d’étude avait été plus longue ou si des échantillons supplémentaires avaient été prélevés une ou deux semaines après l’étude, car on a constaté que les niveaux d’IgA diminuaient également quelque temps après l’expérience du stress dans d’autres études. Une autre explication pourrait être que, bien qu’il ait été demandé aux participants de noter tout changement dans leur état de santé (par exemple, des épisodes de rhume), cela n’a pas été contrôlé, ni comparé aux valeurs aberrantes dans les données d’IgA salivaires. Les rhumes et autres infections respiratoires entraîneraient probablement une augmentation des IgA salivaires, car les IgA font partie de la première ligne de défense du système immunitaire contre les agents pathogènes.

On a constaté une augmentation significative des niveaux de lactobacilles pour le groupe probiotique, également par rapport au groupe placebo, ce qui montre que les bactéries administrées pouvaient survivre dans la cavité buccale (figure 4). Cela a également été confirmé par le résultat du typage RAPD, indiquant la présence de L. plantarum 299v dans les échantillons où les niveaux de lactobacilles étaient supérieurs au seuil de détection. Ainsi, il semble y avoir un lien entre la présence accrue des bactéries probiotiques et la diminution des niveaux de cortisol dans la salive.

5. Conclusions

Il existe une différence significative dans la réponse de la sécrétion de cortisol entre les personnes testées recevant des probiotiques ou un placebo, peut-être en relation avec le stress. Une augmentation significative a par ailleurs été observée dans les niveaux de lactobacilles pour le groupe probiotique par rapport au groupe placebo. En revanche, aucune signification n’a été trouvée pour les IgA salivaires.

Intérêts divergents

Irini Lazou Ahrén est un employé de Probi AB. Le produit et les capsules placebo ont été fournis par Probi AB. Aucun autre intérêt concurrent n’est à signaler.

Contributions des auteurs

Les deux premiers auteurs, Hannah Andersson et Cecilia Tullberg, ont contribué à parts égales à cet article et la première paternité est partagée.

Remerciements

Les auteurs remercient Jie Xu et Marie Kala, de l’Université de Lund, pour leur aide en laboratoire.

Remerciements

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