HEPES

Structure chimique de l’HEPES = N-(2-hydroxyéthyl)
pipérazine-N’-
(acide 2-éthanesulfonique)

L’HEPES est un produit chimique tampon commun similaire au Tris dans les tampons Tris-HCl et aux phosphates dans le PBS. Les tampons sont utilisés pour maintenir le pH à une certaine valeur et peuvent « tamponner » l’ajout de petites quantités d’acides/bases.

Propriété de l’HEPES

Phase stable en fonction de la température, pas de groupes amine primaire, pas de chélation métallique, gamme de pH proche de la physiologie. L’HEPES est souvent utilisé pour maintenir la solubilité des protéines dans les expériences biochimiques.

• pKa à 25C de 7,55 (7,31 à 37C) ; (le 2e pKa à pH 3 ne présente pas d’intérêt)
• plage tampon utilisable de 6.8 à 8,2
• poids moléculaire 238,3 g/mol
• ΔpKa/ΔT = -,014
• HEPES contient des amines tertiaires, qui sont réactives dans certaines conditions.
• Formule chimique : C8H18N2O4S ; acide N-(2-hydroxyéthyl)-pipérazine-N’-(2-éthanesulfonique) ; alias acide 4-(2-hydroxyéthyl)-1-pipérazineéthanesulfonique ; numéro CAS : 7365-45-9

Les tampons sont généralement 1 M, préparés en neutralisant l’HEPES avec de l’hydroxyde de sodium. L’HEPES est essentiellement insoluble jusqu’à ce qu’il soit neutralisé.

Tampon HEPES KOH 1M 7,5

• 700 ml d’eau ultrapure
• 238.3 g de HEPES
• Pellets de KOH (hydroxyde de potassium) pour ajuster le pH à 7,5
• à 1L w d’eau ultrapure ; stériliser par filtration

1M HEPES-NaOH pH 7.5

• 700 ml d’eau ultrapure
• 238,3 g d’HEPES
• ~5,5 g de NaOH (hydroxyde de sodium) en granulés pour ajuster le pH à 7,5
• à 1L w d’eau ultrapure ; stériliser par filtration

Liens

• publications originales : Good’66 PMID 5942950, Good’74 PMID 4206745, Blanchard’84 PMID 6717292
• Wikipedia : solution tampon
• CP : tampons courants
• Liste des tampons courants du Smith College

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