Expliquer ce qui se passe
Cela suppose que vous avez lu l’explication de ce qui se passe pendant la chromatographie sur couche mince. Si ce n’est pas le cas, suivez le tout premier lien en haut de la page et revenez à ce point par la suite.
Le composé bleu est évidemment plus polaire que le jaune – il a peut-être même la capacité de se lier à l’hydrogène. Vous pouvez le dire parce que le composé bleu ne traverse pas la colonne très rapidement. Cela signifie qu’il doit s’adsorber plus fortement sur le gel de silice ou l’alumine que le composé jaune. Le jaune, moins polaire, passe plus de temps dans le solvant et se lave donc beaucoup plus rapidement dans la colonne.
Le processus de lavage d’un composé dans une colonne à l’aide d’un solvant est appelé élution. Le solvant est parfois connu sous le nom d’éluant.
Et si vous voulez aussi collecter le composé bleu ?
Il va falloir des lustres pour laver le composé bleu au rythme où il se déplace en ce moment ! Cependant, il n’y a aucune raison pour que vous ne puissiez pas changer le solvant pendant l’élution.
Supposons que vous remplaciez le solvant que vous avez utilisé par un solvant plus polaire une fois que le jaune a été entièrement collecté. Cela aura deux effets, qui accéléreront tous deux le passage du composé bleu dans la colonne.
-
Le solvant polaire entrera en compétition avec le composé bleu pour l’espace sur le gel de silice ou l’alumine. Tout espace temporairement occupé par les molécules de solvant sur la surface de la phase stationnaire n’est pas disponible pour que les molécules bleues s’y collent et cela aura tendance à les faire avancer dans le solvant.
-
Il y aura une plus grande attraction entre les molécules de solvant polaire et les molécules bleues polaires. Cela aura tendance à attirer toute molécule bleue collée à la phase stationnaire pour la remettre en solution.
L’effet net est qu’avec un solvant plus polaire, le composé bleu passe plus de temps en solution, et se déplace donc plus rapidement.
Alors pourquoi ne pas utiliser ce solvant alternatif en premier lieu ? La réponse est que si les deux composés du mélange se déplacent rapidement dans la colonne dès le début, vous n’obtiendrez probablement pas une si bonne séparation.
Qu’en est-il si tout dans votre mélange est incolore ?
Si vous deviez utiliser la chromatographie sur colonne pour purifier le produit d’une préparation organique, il est très probable que le produit que vous voulez sera incolore même si une ou plusieurs des impuretés sont colorées. Supposons dans le pire des cas que tout soit incolore.
Comment savoir quand la substance que vous voulez a atteint le fond de la colonne ?
Il n’y a pas de moyen rapide et facile de le faire ! Ce que vous faites, c’est recueillir ce qui sort du fond de la colonne dans toute une série de tubes étiquetés. La taille de chaque échantillon dépendra évidemment de la taille de la colonne – vous pourriez recueillir des échantillons de 1 cm3 ou des échantillons de 5 cm3 ou tout ce qui est approprié.
Vous pouvez ensuite prendre une goutte de chaque solution et en faire un chromatogramme en couche mince. Vous placerez la goutte sur la ligne de base à côté d’une goutte provenant d’un échantillon pur du composé que vous fabriquez. En faisant cela de façon répétée, vous pouvez identifier lesquels de vos échantillons recueillis en bas de la colonne contiennent le produit désiré, et seulement le produit désiré.
Une fois que vous le savez, vous pouvez combiner tous les échantillons qui contiennent votre produit pur, puis enlever le solvant. (La façon dont vous sépareriez le solvant du produit n’est pas directement pertinente pour ce sujet et varierait en fonction de leur nature exacte – je ne vais donc même pas tenter une généralisation).